特医食品的维生素检测

特医食品采用的是标准化的科学、均衡、全面的营养配方，容易消化吸收，具有良好的患者适应性，经过肠道进行消化和吸收，在更大程度上保留患者自身地消化吸收功能。

特医食品是特殊状态下食用的食品，不具备针对某种疾病的治疗效果，而是为改善病人的营养状况，为治疗恢复创造良好的条件。

根据病人的需求，特医食品一般分为三大类，有针对普通患者的全营养配方产品，如标准型、高能量密度型、添加纤维素型等；有针对特定疾病的产品，如糖尿病型、肝病型、肾病型等；另外还有一类提供部分营养型，配合其他食品使用。

根据国家GB29922-2013《特殊医学用途配方食品通则》和GB25596《食品安全国家标准特殊医学用途婴儿配方食品通则》有关规定，产品配方中的原料、营养强化剂、添加剂必须符合标签中的用量，属于复合配料的，应逐一列明各组分名称，并折算成在产品中的用量。

其中B族维生素作为添加的微量活性成分，预混在特医食品中。为了评价食品标签的标注成分的准确性，检测方法可参见国标GB/T5009或者GB5413中的相关标准（附图）。

 国际及国内维生素检测方法主要为微生物法和HPLC法。

传统微生物法

    微生物法检测是根据某种维生素是某种细菌生长所必需的原理,通过细菌繁殖程度或代谢产物对该维生素进行定量。微生物法适用于检测多种衍生物的总和(如总叶酸)，并且也是为国际官方机构认可的叶酸检测方法。而中国国家标准GB/T5413中维生素B12、烟酸和烟酰胺、叶酸和泛酸测定的法(仲裁法)均为等同采用AOAC的方法--微生物法。

尽管微生物法灵敏度高、结果准确，但传统微生物法存在许多局限性，如检测周期长,批次检测结果重复性差,检测结果误差大。

VitaFast® 维生素检测试剂盒的特点

R-Biopharm公司根据参考方法（AOAC、EU、§64 LFBG），对传统方法进行了改良，推出了VitaFast®维生素检测试剂盒。该试剂盒采用的原理与国际标准完全相同，引入96孔酶标板和实验室一般常规配备的酶标仪，以目前普遍接受的ELISA微孔板方法为形式和载体，进行维生素的测定。该法检测准确率高（CV<10%）,标准参考样品的回收率可达95-105%。

    VitaFast®维生素检测试剂盒利用包被有对应各种维生素的特异性微生物的微孔板,大大减少了试剂的消耗，缩短了加样及人工读取检测结果的时间；包被有微生物的微孔板、无菌水、培养基等所有必需品均包含在试剂盒中。其中试剂包含3个独立包装，微孔板呈12×8规格，并且每一个微孔均可独立拆分，适用于各种规模的实验室。

VitaFast® 维生素检测试剂盒的操作

VitaFast®维生素检测试剂盒的使用只需将培养基、维生素标准液和稀释过的样品提取液加入微孔板中,在37℃的黑暗条件下培养24-44小时，然后用酶标仪在610-630nm或540-550nm条件下读取结果。与传统的微生物方法相比，VitaFast®维生素检测试剂盒操作简单，检测时间也缩短了4-5天。

    使用VitaFast®维生素检测试剂盒进行检测的具体流程为：①称取1g均质过的样品至50ml的无菌试管中，用双蒸水定容至40ml，在90-100°C水浴中提取30min。之后在无菌条件下进行无菌过滤。②加入10ml无菌水至试剂盒中的维生素培养基瓶中，将溶解后的维生素培养基在95℃水浴中加热5分钟，然后进行无菌过滤。③加入Xml（X数值参见VitaFast®维生素检测试剂盒说明书）无菌水至试剂盒中的标准品瓶中，根据说明书指导制备标准品溶液。④加入150µl 培养基至微孔板中，再加入150µl标准品或样品，用试剂盒中的粘合箔盖住微孔，于37℃下暗室孵育44-48小时（或24-28小时）。⑤孵育后振荡微孔板，揭去粘合箔，用酶标仪在610-630nm条件下读取检测结果。

HPLC法/LC-MS-MS法的特点

高效液相色谱法是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度的不同实现对目标物的分离。高效液相色谱法因其样品前处理简单、样品用量少、分离速度快、可一次性分析多种水溶性维生素而逐渐成为维生素的常用分析方法；LC-MS-MS液质联用法是将色谱作为进样器，质谱作为检测器，将通过色谱分离后的物质进行离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法，比较适用于低纯度样品的分析与检测。

R-Biopharm在仪器检测方面的贡献

R-Biopharm公司配合HPLC高效液相色谱方法和LC-MS-MS法，推出了针对维生素B12及叶酸检测的免疫亲和柱，可用于样品中维生素的纯化、浓缩，使维生素B12含量达到液相色谱法检测限，提高其检测灵敏度。其中，R-Biopharm公司专门为雀巢公司设计开发的新型高效维生素B12亲和柱EASI-EXTRACT Vitamin B12(LGE)，已全面通过雀巢公司研究中心的研究人员和美国AOAC审核和比对验证，成为包括雀巢集团在世界各地的分支机构及相关领域的推荐专用产品。研究人员使用R-Biopharm公司的EASI-EXTRACT Vitamin B12(LGE)对提取后的样品进行纯化，然后通过HPLC或LC-MS-MS进行测定发现，测定准确度高（标准偏差为2.1%，重现性为4.3%，检测限和定量检测限为0.10和0.30µg/kg），检测时间短，操作简便。EASI-EXTRACT® Vitamin B12 (LGE)免疫亲和柱配合HPLC或LC-MS-MS使用，是一种新的快速简单的检测食品中维生素B12的方法。该法适用范围广，可用于婴儿配方奶粉、豆粉、谷物、可乐、保健品及复合维生素等产品中维生素B12 的测定，尤其适用于添加和无添加维生素B12奶制品的检测。

与传统的微生物方法相比，采用EASI-EXTRACT® Vitamin B12(LGE)结合液相色谱的方法测定结果具有快速、方便、灵敏度和准确性高的特点。另外，由于EASI-EXTRACT®®Vitamin B12(LGE)采用了分批抽提的方式，使测定结果具有更高的回收率和再现性。

随着食品工业的发展以及人们对营养健康需求程度的日渐提高，在食品中添加各种维生素将成为一种必然趋势。目前可在膳食补充剂和强化食品中广泛使用的维生素达15种以上，如考虑到不同形式则可以达到30种。针对这些不同形式维生素的检测，一些传统的方法显然已不能满足简便、快速、准确的要求。为此，致力于快速检测的德国拜发R-Biopharm公司将继续秉承研发宗旨，不断优化已有产品，推出更能满足市场需求的新产品。例如，针对维生素B的检测，R-Biopharm还开发了灵敏度和特异性都很高的ELISA酶联免疫试剂盒；针对维生素C的检测推出了酶法试剂盒。

需详细了解维生素检测，欢迎致电021-66051137

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