四环素类药物Elisa检测试剂盒

四环素类药物(Tetracyclines，TCs)是以四并苯为母核的一族抗生素，其中四环素、土霉素、金霉素及多西环素以其优良的抗菌性、稳定的药性及低廉的价格，在畜牧业生产中广泛用于疾病的治疗和预防及促进生长。但该类药物过量使用会导致畜产品中高浓度药物残留，直接影响消费者身体健康，并导致体内细菌耐药性增加，能够与骨骼中的钙结合，抑制骨骼和牙齿的发育。 
  
 我国《动物性食品中兽药最高残留限量》规定牛奶和肌肉组织中四环素、土霉素及金霉素(单体或复合物)及多西环素最高残留限量为100μg/L(μg/kg)，在肾脏，肝脏及鸡蛋中分别不得超过600、300及200ppb。 
  
 高效液相色谱法目前是分析四环素类药物残留量的主要方法，但需要一系列繁琐的提取和净化处理步骤，而且存在回收率低，杂质干扰大，并且需要昂贵的实验室设备等问题。ELISA法灵敏度较高、特异性强、测定方法简单快速，可同时筛选检测大量样品。目前常将ELISA法作为筛选方法，高效液相色谱-串联质谱法作为确证方法配套使用。使用飞远科技的ELISA试剂盒可同时测定4种兽用四环素类药物残留量，测定组织中的四环素类抗菌素残留快速准确并且测定牛奶时不需样品制备。 
 试剂盒中含有所有的试剂，3小时内可以完成96个孔的试验（一块酶标板）。 
 【适用范围】 
  
 本操作规程规定了四环素类药物残留酶联免疫检测方法的样品前处理和检测方法。 
  
 本操作规程适用于肌肉（猪鸡鱼）、肝脏（猪鸡）、猪肾脏、蜂蜜、牛奶、饲料和尿液中四环素类残留检测。 
  
 对于肌肉、牛奶、蜂蜜、饲料、尿液中的检测下限为5ppb，肝肾中为10ppb。 
  
 【原理】 
  
 本试剂盒采用间接竞争ELISA原理检测四环素类药物残留。微孔板包被有结合到蛋白上的四环素。检测时，每一孔中依次加入标准液或样品溶液、抗体工作液，游离的四环素与固定在酶标板上的四环素竞争抗体结合位点，游离药物与抗体的结合物在洗涤步骤中被除去。然后加入酶标二抗，通过孵育、洗涤、加入底物等步骤，最后加入终止液使颜色由蓝色转变为黄色，在450nm处测量吸光值。吸光值与样品中药物的浓度成负相关。 
  
 【灵敏度】 
  
 本试剂盒最低检测限为5 µg/kg，定量限为10ppb。 
  
 【 回收率】 
  
 肌肉：90.5％～103.8％ 
 肝脏：85.6％～112.3％ 
 肾脏：62.3％～118.5％ 
 蜂蜜：81.7％～115.6％ 
 饲料：71.7％～112.3％ 
 牛奶：88.5％～101.5％ 
  
 【精密度】 
  
 本试剂盒板内板间变异系数<20％ 
  
 【特异性】 
  
 本试剂盒与同类相似化合物的交叉反应结果见表1： 
 表1试剂盒测交叉反应率结果 
 药  物 交叉反应率(％) 
 四环素 100％ 
 金霉素 100％ 
 土霉素 80％ 
 强力霉素 90％ 
  
 【储藏条件和保存期】 
 保存于2～8℃，有效期为12个月。 
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