德国拜发公司 华南地区总代理 广州测迪生物科技有限公司
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德国拜发/IFP公司是世界上唯一一家生产B族维生素微生物方法快速检测试剂盒的生产商,产品符合AOAC,GB等相应的标准。该公司凭借自己卓越的研发实力,在维生素、氨基酸、过敏原、致病菌、抗生素、激素等快速检测产品领域在全球获得了全球各大公司及政府实验室的好评。其中维生素检测产品适合检测乳品、饲料、饮料、含维生素食品、药品、血液等样品。采用国标方法检测食品中维生素时,需要在实验室中建立微生物保存、传代、培养程序,不仅过程复杂,耗费人力物力,同时由于很难保证检测用微生物具有稳定的活力,导致检测结果批间误差巨大。德国拜发/IFP维生素检测试剂盒特点信赖:依据多种官方参考方法(AOAC,EU&LFGB,GB)研发,精确度高(CV<10%)。简单:试剂盒微孔板中包被菌种,无需另外购买。样品只需热水浴提取即可。快速:孵育时间为24-44小时,比传统方法节省3-5天。VitaFast® Folic Acid 简介VitaFast® Folic Acid试剂盒简单易用,采用微生物方法,在微孔板中定量检测食品、药品和饲料中的叶酸总量(包括添加和原生叶酸)。所有所需的试剂均包含在试剂盒中。本试剂盒共能提供96次检测(包括标准品)。最后使用ELISA reader (610 - 630 nm 或者540 - 550 nm)进行读数。含添加叶酸的样品处理: 液态样品:无菌过滤和稀释 固态样品:均质、提取(离心)、无菌过滤和稀释含原生叶酸的样品处理: 固态样品:均质、酶化处理、提取、(离心)、无菌过滤和稀释所需时间:试验过程…………………….约10分钟 计算………………………….2分钟孵育: 黑暗、37 °C条件下44-48小时标准范围:0.16 - 1.28 μg / 100 g (ml)回收率: 90 - 105 %Intra-assay CV for standards: < 10 %Inter-assay CV for standards: < 10 % 1.产品用途VitaFast® Folic Acid微孔板检测试剂盒是利用微生物方法,用于定量检测食品、药品和饲料中的叶酸总量(包括添加和原生叶酸)。本微生物检测系统符合EN14131标准。2.检测原理叶酸是从样品稀释提取所获得的。将稀释了的提取物和叶酸检测培养基加入包被有鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus (ATCC Nr. 7469)的微孔中。Lactobacillus rhamnosus的生长状况取决于叶酸的含量。添加叶酸作为标准或者作为样品混合物,细菌会一直生长直至叶酸被消耗殆尽。孵育条件应为黑暗、37 °C条件下孵育44-48小时。细菌生长时新陈代谢的强度和叶酸的含量形成关系并可以绘制称标准曲线,最后通过ELISA reader在610 - 630 nm (或者540 - 550 nm)读取结果。3. 检测说明水质在整个测试过程中起着十分重要的作用。本试剂盒中带有作为溶剂的无菌蒸馏水,用于重组、稀释标准品和样品的提取。附加的蒸馏水在以上过程中都是必不可少的。要求整个检测过程中保持无菌操作。所使用的玻璃器皿保证无化学残留物、清洁剂、化学物质和微生物污染。因此,玻璃器皿使用前先用3 mol / l的盐酸漂洗,然后再用蒸馏水250 °C (482 °F)条件下加热1小时。在使用前回至室温。样品制备和提取可以不用在无菌条件下进行。样品的过滤、稀释与检测前的准备工作则与整个检测过程一样必须在无菌条件下进行。检测的每一个步骤都需要校正。标准品和样品应该进行3次检测(注意:官方标准中推荐3次检测方法)。未知样品应该用2份提取物的稀释液检测(误差应该小于10%)。如果在更高的稀释液中叶酸含量更多,则可能含抑制剂,比如重金属或者抗生素。4. 提供试剂每个试剂盒中包含:1 x 96孔微孔板,包被有 Lactobacillus rhamnosus (ATCC Nr. 7469)3 x 无菌蒸馏水 (30 ml) ,用于准备培养基、标准品和样品提取稀释液3 x 叶酸培养基 (固体)3 x 叶酸标准品 (固体)3 x 叶酸缓冲液 (液体)3 x 粘性箔1 x 微孔板固定器5. 需要试剂但试剂盒种不提供 −黑暗条件下的培养箱,37 °C (98.6 °F)−90 -100 °C (194 - 212 °F)水浴,或者高压灭菌锅−ELISA reader 610 - 630 nm (540 - 550 nm)−pH 测量仪−离心机,大约10000 x g−刻度移液枪 20 - 200 µl; 100 - 1000 µl−灭菌微量移液枪 tips 20 - 200 µl and 100 - 1000 µl−无菌烧瓶 1.5 - 2.0 ml−移液枪 5 or 10 ml−带帽的无菌离心机管 (15 and 50 ml)−带无菌注射器的0.2um无菌滤膜−双蒸水用于样品提取(available at ifp)−浓缩NaOH−1 mol / l NaOH (0.4 g 溶解于100 ml水中)检测原生叶酸所需试剂−胰液素(Sigma P1750)−磷酸(盐)缓冲液(0.5 mol / ;0.1 % 抗坏血酸盐):溶解于1升水7.8 g脱氢磷酸钠二水化合物和1 g 抗坏血酸钠, 校正pH值至7.26.用户须知−检测培养基有可能刺激眼睛、皮肤和隔膜−完成试验后须根据规章处理检测仪器(如使用高压灭菌锅)7.贮藏条件试剂盒应存放在2-8℃条件下处理过的试剂(标准品、培养基)和叶酸缓冲液应马上使用,并在检测后丢弃将未使用的微孔板条放回原来的箔袋中,并与干燥剂一起重新封好,放在2-8℃温度下。微孔板须防止受潮或受到其他污染。请勿在试剂盒标注的有效期之后使用。8.试剂失效的迹象空白的吸光度值大于标准品1最高浓度标准品的吸光度值小于0.6(630nm)9.样品处理 样品必须储存在4℃、避光条件下。检测富集营养样品中的游离叶酸时,热水提取方法通常就足够了。但是富集营养的饮料可以在过滤之后直接使用。由于使用热水提取,所以原生叶酸只能被部分检测。对于检测原生V B12总量,样品应进行缓冲和用酶水化处理。样品提取时需要1g或1ml样品溶解于40ml双蒸水或提取溶液中。相当于样品的稀释倍数为40,这个稀释倍数已经包括在标准曲线中。样品提取后需要进一步稀释。稀释倍数取决于由标准曲线中间部分显示的标准浓度,它由期望的成分除以标准曲线中间区域所显示的标准品浓度获得(详见产品标签或认证,每100g或100ml浓度)。至于涉及到胶囊或药片时,浓度时常表达为“/片胶囊”,此时浓度必须转化成“/100g”(详见11.的计算示例)。这个稀释倍数在计算结果的时候必须考虑。样品提取时使用无菌滤膜(0.2μm)进行过滤,此时。如果由于固体颗粒或者浑浊导致过滤不顺利,则在无菌过滤之前应先离心(至少在8000g的离心力下离心5分钟)。样品提取液可以在提取当天使用,使用之前应避光保存。提取稀释液应马上使用。9.1.液体样品(富含维生素的果汁、健康饮品)加入1ml样品至50ml无菌离心管中,准确加入双蒸水至40ml,摇匀。使用无菌0.2μm滤纸过滤1.0~1.5ml样品到一个无菌试管中。是否进一步稀释则取决于浓度范围(详见计算示例中的稀释倍数)。9.2.含维生素的可溶固体样品(粉末、药片)称取1g样品至50ml无菌试管,用双蒸水准确加至30ml刻度。摇匀至样品溶解。用NaOH调整pH值至7.0~7.5。然后加无菌水精确至40ml。用0.2μm无菌滤纸过滤1.0~1.5ml样品至一无菌试管中。是否进一步稀释则取决于浓度范围(详见计算示例中的稀释倍数)。9.3.维生素胶囊、药片首先胶囊或药片的重量必须确定(平均5~10个胶囊或药片)。药片用研钵或搅拌机均质,胶囊须切开并取出其中的颗粒进行试验。称取1g药片或切开1个胶囊至一个50ml无菌离心管中,用双蒸水加至30ml,摇匀。用NaOH调整pH值至7.0~7.5。然后加无菌水精确至40ml。在90~100℃水浴中提取30分钟。在提取时试管须振荡至少5次。当然期间必须保证试管是否充分封闭。迅速降温至30℃以下。使用0.2μm无菌滤膜过滤1.0~1.5ml样品至一个无菌试管中。是否进一步稀释则取决于浓度范围(详见计算示例中的稀释倍数)。9.4富含维生素的谷物、婴儿食品、面包、面粉和食品添加剂称量1g均质过的样品至一个50ml无菌试管中,加入双蒸水至30ml,充分摇匀。用氢氧化钠溶液调整其pH值至7.0-7.5,用双蒸水加至40ml在90~100℃水浴中提取30分钟。在提取时试管须振荡至少5次。迅速冷却至室温。使用0.2μm无菌滤纸过滤1.0~1.5ml样品至一个无菌试管中并进行进一步稀释。9.5.原生叶酸提取复合物时,检测含原生叶酸的样品必须先经过酶化处理。以下检测过程已经开始在检测牛奶时使用。称取1g均质过的样品至一个50ml无菌离心管中,用磷酸盐缓冲液加至40ml(0.05mol/l;0.1%抗坏血酸盐;pH7.2)。之后在90~100℃水浴中提取30分钟。在提取时试管须振荡至少5次。冷却至室温,加入10mg干胰液素。旋紧管盖,摇匀,在37℃条件下培养24小时。随后在90~100℃水浴中提取30分钟。迅速冷却至室温。使用0.2μm无菌滤纸过滤1.0~1.5ml样品至一个无菌试管中。是否进一步稀释则取决于浓度范围(详见计算示例中的稀释倍数)。德国拜发集团旗下IFP实验室出品的维生素B族检测系列试剂盒产品VitaFast®,是按照ISO国际标准设计的国际最快的检测各类食品中维生素B族含量的试剂盒。VitaFast® 维生素检测产品系列包括维生素B1、B2、B12、生物素、泛酸、烟酸、B6、肌醇等的检测。
VitaFast® 维生素检测产品系列秉承了德国拜发R-Biopharm 公司品牌产品的一贯特点,操作简单方便,将维生素B族的检测时间由传统方法的5-7天成功缩短到1-2天,避免了使用传统方法时经常出现的菌株培养问题。同时该试剂盒系列可以区分出食品中的天然维生素B族含量及人工添加的维生素B族含量,极大程度地实现了对食品中维生素B族含量的监控和测定。
在经过了各级不同官方实验室的验证后,德国拜发R-Biopharm 集团旗下的五个VitaFast® 维生素检测产品已先期通过了AOAC认证,其他产品的AOAC认证也将在近期获得。
德国拜发R-Biopharm 集团旗下IFP实验室出品的维生素检测产品包括:
VitaFast® Folic acid 订货号: P1001
VitaFast® Vitamin B12 订货号: P1002
VitaFast® Vitamin B7 订货号: P1003
VitaFast® Vitamin B3 订货号: P1004
VitaFast® Pantothenic Acid 订货号: P1005
VitaFast® Vitamin B1 (Thiamin) 订货号: P1006
VitaFast® Vitamin B2 (Riboflavin) 订货号: P1007
VitaFast® Vitamin B6 (Pyridoxin) 订货号: P1008
VitaFast® Inositol 订货号: P1009
chicken pancreatin 鸡胰酶 订货号: P2002
固态叶酸标准品 订货号: P3001
固态维生素B12标准品 订货号: P3002
固态生物素标准品 订货号: P3003
固态泛酸标准品 订货号: P3005