优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒检测结果准确可靠的必要条件。抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体ELISA试剂盒的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。
小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒操作步骤:
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
2. 小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒相关产品如下:
xyB758Hu 核糖核酸酶A3(RNASE3)ELISA试剂盒xyB707Hu 髓分化因子88(MyD88)ELISA试剂盒xyB708Hu 法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)ELISA试剂盒xyB710Hu 糖盏蛋白(GC)ELISA试剂盒xyB712Hu Kruppel样因子5(KLF5)ELISA试剂盒xyB740Hu 信号传导转录激活因子1(STAT1)ELISA试剂盒xyB719Hu 蛋白激酶Bβ(PKBβ)ELISA试剂盒xyB727Hu 信号传导转录激活因子5B(STAT5B)ELISA试剂盒xyB728Hu 生长分化因子2(GDF2)ELISA试剂盒xyB729Hu 癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒xyB743Hu 信号传导转录激活因子3(STAT3)ELISA试剂盒xyB744Hu 泛素D(UBD)ELISA试剂盒xyB745Hu 血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)ELISA试剂盒xyB750Hu 肿瘤坏死因子配体超家族成员13(TNFSF13)ELISA试剂盒xyB752Hu Ⅰ类主要组织相容性复合体E(MHHZ)ELISA试剂盒xyB753Hu 谷氨酸受体相互作用蛋白1(GRIP1)ELISA试剂盒xyB756Hu 表皮转谷氨酰胺酶(TGM3)ELISA试剂盒xyB757Hu 肌动蛋白束蛋白(FSCN)ELISA试剂盒xyB759Hu 羟甲基戊二酰辅酶A合酶(HMGCS)ELISA试剂盒xyB760Hu 再生胰岛衍生蛋白1α(REG1α)ELISA试剂盒xyB761Hu 抑瘤素M受体(OSMR)ELISA试剂盒xyB762Hu 抑制素βB(INHβB)ELISA试剂盒xyB854Hu 钙腔蛋白(CALU)ELISA试剂盒xyB836Hu 淀粉酶α(Amyα)ELISA试剂盒xyB837Hu 白介素2受体α(IL2Rα)ELISA试剂盒xyB840Hu 小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)ELISA试剂盒xyB844Hu 桩蛋白(Pax)ELISA试剂盒xyA092Hu 巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)ELISA试剂盒xyA093Hu 巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA试剂盒