猪蓝耳病毒RT/盒-PCR检测试剂盒

猪瘟病毒RT-PCR 检测试剂盒，采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR ）技术检测疑似感染动物血清或组织中的CSFV，适用于CSFV 的检测、诊断和流行病学调查。该试剂盒不能区分强弱毒。【原理】利用吸附柱提取RNA作为模板，在反转录酶的作用下，以引物为起点合成与RNA 模板互补的cDNA链；然后在DNA 聚合酶的作用下，经高温变性、低温退火和中温延伸的多次循环，使特异DNA 片段的拷贝数放大数百万倍。将扩增的DNA 片段进行电泳、染色后，在紫外灯下，肉眼可见DNA 片段的扩增带。【试剂盒组份】

1. 生理盐水	20mL	8. 吸附柱和收集管	10套
2. 裂解液	6mL	9. 0.2 mL 薄壁PCR 管	15个
3. 洗涤液A	7mL	10. RT-PCR 反应液A	180μL
4. 洗涤液B	7mL	11. RT-PCR 反应液B	50μL
5. 洗脱液	500μL	12. 50 倍TAE 电泳缓冲液	20mL
6. 阴性对照	300μL	13. 染色液	10μL
7. 阳性对照	300μL

注：塑料袋内试剂（阳性对照、RT-PCR反应液A和B）-20 ℃冻存，裂解液2-8℃冷藏，其他室温保存。【操作方法】一、样品制备1 样品采集：病死或扑杀的猪，取扁桃体、淋巴结等组织病变部与健康部交界处组织；待检活猪，用注射器取血5 mL，2～8 ℃保存。（要求送检病料新鲜，严禁反复冻融。）2 样品处理： 2.1 组织样品的处理：称取组织0.1g于研磨器中磨碎，再加1mL生理盐水继续磨至无块状物；然后将样品转至1.5 mL灭菌离心管中，8000 rpm离心2 min，取100 µL上清于1.5 mL 灭菌离心管中。2.2 全血样品的处理：待血凝后取100 µL血清于1.5 mL 灭菌离心管中。2.3 阳性对照的处理：取阳性对照 100 µL于1.5 mL 灭菌离心管中。2.4 阴性对照的处理：取阴性对照100 µL于1.5 mL 灭菌离心管中。二、病毒RNA的提取1. 取已处理的样品、阴性对照和阳性对照，分别加入450µL裂解液，充分颠倒混匀，室温静置3min 。2. 加入275µL无水乙醇，轻轻混匀。3. 将混合液吸入吸附柱中（吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质，以免离心时堵塞吸附柱），10,000 rpm 离心1min，弃去收集管中液体，套回收集管。4. 向吸附柱中加入500µL洗涤液A，10,000 rpm 离心1min，弃去收集管中液体，套回收集管。5. 向吸附柱中加入500µL洗涤液B，10,000 rpm 离心1min，弃去收集管中液体，套回收集管。6. 空柱10,000 rpm 离心2 min。7. 将吸附柱移入新的无RNA酶的1.5 mL离心管中，在膜中央加入30µL洗脱液，室温静置2min，10,000 rpm 离心1min，获得总RNA。三、RT-PCR1. 反应体系：分别取14µL RT-PCR反应液A（用前混匀）、4µL RT-PCR反应液B（用前混匀）和2µL模板RNA，混匀。2. 反应程序：在PCR仪上运行以下程序：42 ℃ 45 min，94 ℃ 3 min ；94 ℃ 30 s 、55℃ 30 s 、72 ℃ 30 s，35个循环；72 ℃延伸10 min。四、电泳1. 制胶：用50倍稀释的TAE电泳缓冲液配制1%琼脂糖凝胶。2. 电泳：待胶凝固后，取5µL PCR扩增产物点样于琼脂糖凝胶孔中，以5V/cm的电压于50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液中电泳。3. 染色：取50 倍稀释的TAE 电泳缓冲液30mL，加入10µL染色液，混匀后将胶浸泡30min，于紫外灯下观察结果。【结果判断】阳性对照出现380bp扩增带，阴性对照无带出现（引物带除外）时，实验结果成立。被检样品出现380bp扩增带为猪瘟病毒阳性，否则为阴性。【需用但未提供的材料】组织研磨器、眼科剪、眼科镊、一次性注射器、琼脂糖、经焦碳酸二乙酯（DEPC ）处理的灭菌1.5mL 离心管和吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）。【注意事项】1．本试剂盒有效期为6个月，不要使用超过有效期限的试剂，试剂盒之间的组分不要混用。2．所有试剂应在规定的温度储存，使用时拿到室温下，使用后立即放回。3．注意防止试剂盒组分受污染。使用前将塑料袋内试剂瞬离15s，使液体全部沉于管底，放于冰盒中，吸取液体时移液器吸头尽量在液体表面层吸取。4．严格按试剂盒说明书操作可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须精确。5．RNA提取过程中，应戴口罩、勤换手套，尽量缩短操作时间。6．所有接触病料的物品均应合理处理，以免污染实验室。【生产企业】 广州健仑生物科技有限公司
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编码	产品名称	产品规格	检测方法
猪病检测系列
JL0101	伪狂犬病毒抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0104	伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0102	伪狂犬病毒抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL0103	伪狂犬病毒抗体乳胶凝集试剂	100T/盒	乳胶凝集法
JL0105	伪狂犬病毒PCR检测试剂盒	10T/盒	PCR
JL0201	蓝耳病病毒抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0202	蓝耳病病毒抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL0203	蓝耳病病毒抗体乳胶凝集试剂	100T/盒	乳胶凝集法
JL0204	猪蓝耳病毒RT/盒-PCR检测试剂盒	10T/盒	PCR
JL0903	猪瘟病毒抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0902	猪瘟病毒抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL0904	猪瘟病毒抗原金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL0905	猪瘟病毒RT/盒-PCR检测试剂盒	10T/盒	PCR
JL0801	猪口蹄疫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0802	猪口蹄疫抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL1901	圆环病毒抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL1902	圆环病毒抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL1903	猪圆环病毒PCR检测试剂盒	10T/盒	PCR
JL0301	细小病毒抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0302	细小病毒抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL0303	细小病毒抗体乳胶凝集试剂	100T/盒	乳胶凝集法
JL0501	乙型脑炎抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0502	乙型脑炎抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL0503	乙型脑炎抗体乳胶凝集试剂	100T/盒	乳胶凝集法
JL0504	乙型脑炎病毒RT/盒-PCR检测试剂盒	10T/盒	PCR
JL0701	猪衣原体抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL0702	猪衣原体抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL1001	猪支原体抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL1002	猪支原体抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL1201	弓形虫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL1202	弓形虫抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL1301	旋毛虫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL1302	旋毛虫抗体金标检测条	50T/盒	金标试纸条
JL1303	旋毛虫抗原金标检测条	50T/盒	金标试纸条
JL1401	猪囊虫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL2001	家畜血吸虫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL2002	家畜血吸虫抗体金标检测卡	50T/盒	金标试纸条
JL2201	包虫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL2302	猪流感病毒抗原金标检测卡	20T/盒	金标层析卡
广州健仑生物科技有限公司 电话： 020-82574011 手机： 13802429590 传真： 020-28216107
编码	产品名称	产品规格	检测方法
禽病检测系列
JL0 0101	鸡新城疫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL00102	鸡新城疫抗原金标检测卡	20T/盒	金标层析卡
JL00103	鸡新城疫抗体金标检测卡	20T/盒	金标层析卡
JL00104	新城疫血凝及血凝抑制试验抗原	2ml	用于禽新城疫免疫效果的监测
JL00105	新城疫血凝及血凝抑制试验阳性血清	2ml
JL00106	新城疫病毒RT/盒-PCR检测试剂盒	10T/盒	PCR
JL00401	法氏囊抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL00402	法氏囊抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL00403	法氏囊抗原金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL00601	鸡传染性喉气管炎抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL00602	鸡传染性喉气管炎抗体金标检测卡	40T/盒	金标层析卡
JL00701	鸡减蛋综合症EDS76抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL00702	鸡减蛋综合症EDS76抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL00801	鸡病毒性关节炎抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL01001	禽流感抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL01002	禽流感抗原金标检测卡	20T/盒	金标层析卡
JL01003	禽流感H5抗原金标检测卡	20T/盒	金标层析卡
JL01004	禽流感H9抗体金标检测卡	20T/盒	金标层析卡
广州健仑生物科技有限公司 电话： 020-82574011 手机： 13802429590 传真： 020-28216107
编码	产品名称	产品规格	检测方法
犬检测系列
JL10101	犬狂犬病抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL10102	犬狂犬病抗原金标检测卡	20T/盒	金标层析卡
JL10201	犬恶心丝虫抗体检测试剂盒	48T/盒	ELIJL
JL10301	犬肺吸虫病抗体检测试剂盒	48T/盒	ELIJL
JL10401	包虫病抗体检测试剂盒	48T/盒	ELIJL
JL10501	尿液快速检测试剂条	100T/盒	金标试剂条
JL10601	犬弓形虫抗体检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL10602	犬（猫）弓形虫抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL10603	犬（猫）弓形虫抗原检测试剂盒	96T/盒	ELIJL
JL10701	犬细小抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL10702	犬细小抗原金标检测卡	10T/盒	金标层析卡
JL10801	犬瘟热抗原金标检测卡	10T/盒	金标层析卡
JL11001	犬衣原体抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
JL11101	犬支原体抗体金标检测卡	40T/盒	金标渗滤卡
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