供应呕吐毒素试剂盒

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品牌：	苏微
单价：	面议
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发货期限：	自买家付款之日起 1 天内发货
所在地：	江苏无锡市
有效期至：	长期有效
最后更新：	2017-04-03 21:02
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公司基本资料信息

产品详细说明

脱氧雪腐镰刀菌烯醇酶联免疫(ELISA)快速检测试剂盒1、简介本试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附ELISA原理快速定量检测小麦、玉米和饲料等样品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）。小麦、玉米、饲料的前处理包括：提取、过滤、稀释，处理时间大约为20-40分钟。本试剂盒的检测限为：0.2 ppm；小麦、玉米、饲料中DON的回收率 ≥80%；批内、批间变异系数 <15%。 2、试剂盒组成A. 48孔DON酶标板------------------------------------------------------------ 8孔×6条 B. 20×浓缩洗涤液：25 mL (用蒸馏水稀释20倍使用)--------------------------1瓶 C. DON抗体：4 mL---------------------------------------------------------------------1瓶D. 酶标二抗：6 mL---------------------------------------------------------------------1瓶 E. 显色液：6 mL ------------------------------------------------------------------------1瓶F. 终止液：3 mL-------------------------------------------------------------------------1瓶G. DON标准品：1 mL/瓶（0、0.5、1.0、2.0、4.0 ppm）-----------------各1瓶H.说明书 ---------------------------------------------------------------------------------1份注意：标准品含有DON、终止液含2 N H₂SO₄，需小心取用。请勿在有效期外使用本试剂盒或将不同批次的试剂混用。DON标准品的实际浓度为0、50、100、200、400 ng/mL。 3、贮存条件与有效期2-8℃避光贮存，忌0℃以下冻存。未开封试剂盒有效期为12个月，开封后3个月内用完（见包装盒上标签有效期）。 4、样品处理程序 4.1脂肪含量低的固体样品（如大米、玉米和小麦等）4.1.1称取5 g粉碎样品于100 mL带塞三角瓶内，准确加入25 mL超纯水或蒸馏水。4.1.2将加入水的样品放入振荡器内（或用手强力振荡），充分振荡3分钟后，用定性滤纸过滤，收集滤液。4.1.3取滤液4 mL，加入4 mL 超纯水或蒸馏水，混匀，用定性滤纸过滤，滤液为样品待检液。4.2啤酒、麦芽汁取5 mL样品于100 mL带塞三角瓶内，准确加入45 mL纯水或蒸馏水，混匀，用定性滤纸过滤，该溶液为样品待检液。注意：某些样品待检液久置影响检测结果的准确性，为保证检测的准确性，样品提取后请即时检测。若样品待检液不立即检测，请将其存储于棕色玻璃瓶内，2-8℃避光保存。试剂盒在使用前，请将试剂盒内所有试剂放到室温（20-25℃）进行温度平衡；试剂用完后立即将其放置回2-8℃冰箱内保存。在每个步骤操作时，速度要快，不要使板孔暴露在空气中时间过久，避免酶标板变干。未用完的酶标板需密闭于原铝箔袋内，防止受潮且保存于2-8℃冰箱内。在温育时，避免光照，建议将酶标板置于湿盒内(在有盖容器内放置一块平整湿纱布)进行温育。若样品数量超过20份，请用多通道加样器操作。 5、定量检测程序5.1 实验准备：从冰箱取出试剂盒，恢复至室温后，打开铝箔袋，取出所需数量的板条插入微孔架，记录空白、DON标准品①②③④⑤号及样品的位置（可参照下表所示）。其余板条封口后放入冰箱。将20×浓缩洗涤液用超纯水或蒸馏水稀释20倍，待用。

	1	2	3-12
A	空白	样品
B	标准品①	样品
C	标准品②	样品
D	标准品③	样品
E	标准品④	样品
F	标准品⑤	样品
G	样品	样品
H	样品	样品

5.2加样：空白孔加入100 µL 洗涤液(不加DON抗体)，DON标准品孔和样品孔相应地加入标准品(①②③④⑤)和样品待检液50 µL（如上表所示加入），再加入DON抗体(50 µL )，此时各孔中溶液体积为100 µL。将酶标板在水平桌面上轻微振荡（注意避免液体溅出）使之混匀，放入湿盒内(在有盖容器内放置一块平整湿纱布)，37℃温育30分钟。注意：此操作步骤要快，尽量保持前后孔温育时间一致，每次加样须更换新的吸头。5.3洗板：甩出孔中的液体，用洗瓶或移液器将洗涤液加入各孔中(满孔)，再次甩出孔中液体，将酶标板倒置在吸水纸上拍打以除去孔中的液体，再重复操作洗涤步骤三次(共洗四次)。5.4加酶标二抗：将洗好的酶标板平放，加入酶标二抗100 µL /孔，将酶标板置于湿盒内， 37℃温育30分钟。5.5洗板：参照5.35.6显色：将洗好的酶标板平放，加入显色液100 µL /孔，37℃显色5分钟(若显色较浅，可适当延长，但不宜超过10分钟)。5.7终止及测定：将显色完毕的酶标板取出，加入终止液50 µL/孔，轻微震荡混匀，以空白孔调零，在450 nm处测量吸光值A（在加入终止液5分钟内读取光度值）。5.8结果判定：以DON标准品浓度0.5ppm、1.0ppm、2.0ppm、4.0ppm的常用对数值（1gC）为横坐标，各浓度标准品相应的吸光值A与0ppm的标准品A值的比值(B/B₀%)为纵坐标[B/B₀%=标准品（或样品）的吸光值/0ppm标准品的吸光值×100%]，绘制标准曲线。根据样品孔的吸光值计算样品的B/B₀%值，查标准曲线，可得到相应样品中DON的含量(已考虑样品提取的稀释倍数，结果无需换算)。(或可直接用RADEWIN 等专用ELISA分析软件对数据进行分析得出结果)。如果检测结果高于检测上限，请将待测样品提取液用超纯水或蒸馏水稀释后再检测，测定结果乘以相应的稀释倍数。 6、限量(定性)检测程序样品处理程序见4，适用于同时定性检测多个限量标准不同的样品，以DON标准品③号(1.0ppm)作参照进行定性比较，不需作标准曲线。6.1实验准备：从冰箱取出试剂盒，恢复至室温后，打开铝箔袋，取出所需数量的板条插入微孔架，记录空白、DON标准品③号(1.0ppm)及样品的位置，其余板条封口后放入冰箱。6.2反应：空白孔加入100 µL 洗涤液(不加DON抗体)。DON标准品孔和样品孔相应地加入标准品③号(1.0ppm)和待检样品提取液各50 µL，再加入DON抗体(50 µL )，此时各孔中溶液体积为100 µL。将酶标板在水平桌面上轻微振荡（注意避免液体溅出），使之混匀，放入湿盒内(在有盖容器内放置一块平整湿纱布)，37℃温育30分钟。注意：此操作步骤要快，尽量保持前后孔温育时间一致，每次加样须更换新的吸头。 6.3洗板：参照5.3 6.4加酶标二抗：参照5.46.5洗板：参照5.56.6显色：参照5.66.7终止及测定：参照5.7 (目测法不加终止液)6.8结果判定：目测法(未加终止液前目测)：比较样品孔与标准品参照孔的颜色，若显色比标准品参照浅者，则为阳性，样品中DON的含量超出限量标准；若深者，则为阴性；若颜色接近，则需用酶标仪测吸光值比较。仪器法：酶标仪检测在450 nm波长处各孔的吸光值A，若样品的A值<标准参照的A值，为阳性，表示样品中DON的含量超出限量标准；若样品A值≥标准参照A值，为阴性。 7、自备仪器及试剂7.1 酶标仪（内置450 nm滤光片）或黄曲霉毒素B₁专用测定仪。7.2 20-200 uL微量移液器及配套吸头。7.3恒温培养箱（0℃-50℃）。7.4冰箱。7.5感量0.01g的天平。7.6小型粉碎机或碾钵。7.7玻璃器皿：三角瓶、量筒、具塞试管、滴管、移液管等7.8其他：滤纸、吸水纸等。 8、国家标准GB/T 14929.594 谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定方法：薄层色谱和ELISA法。GB 163291996 小麦、面粉、玉米及玉米粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇限量标准为1000 µg/kg。

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