提供喹诺酮类药物（QNS）检测试剂盒提供OEM

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喹诺酮类药物（QNS）检测试剂盒使用说明书
产品名称通用名称：喹诺酮类药物（QNS）检测试剂盒英文名称：ELISA Kit to DetectQuinolones产品编号：TH009-1 概要喹诺酮类药物是一类十分重要的广谱抗生素，能抑制细菌DNA螺旋酶，具有高效、低毒、组织穿透力强等特点，已成为兽医临诊和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，被大量应用于动物疾病的预防和治疗。因为其耐药性和潜在的致癌性而引起广泛的关注。本公司研发的喹诺酮类药物检测试剂盒是应用抗原、抗体特异性的免疫学原理而建立的一种敏感、特异、简便及快速的检测产品，适用于现场大批量样品检测。包装规格96T/盒预期用途适用于蜂蜜、水产品（鱼肉、虾肉）、动物组织(肌肉、肝脏等)以及纯牛奶样本中喹诺酮类药物残留量的定量检测。测定原理    样品中的喹诺酮类药物与酶标板上固定的抗原特异性竞争抗体，加入酶结合物，与抗体反应，通过酶催化显色剂显色，根据显色的深浅来判断样品中喹诺酮类药物的含量。如果样品中的喹诺酮类药物量少，显色深，反之，则显色浅。检测时设置标准曲线，通过标准曲线测定样品中喹诺酮类药物的含量。反应时间样品处理时间：1) 蜂蜜、水产品、动物组织……………….40分钟2) 纯牛奶…………………………………… 5分钟试剂盒反应时间……………………………. 75分钟产品组成1、喹诺酮类药物酶标板一块：96孔2、喹诺酮类药物标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：  0ppb，1 ppb，3 ppb，9 ppb，27 ppb，81 ppb3、喹诺酮类药物标准品（添加实验）：1瓶（1ml），1ppm4、喹诺酮类药物抗体工作液：1瓶（7 ml），直接使用5、喹诺酮类药物酶结合物：1瓶（13ml），直接使用6、10×浓缩洗涤液：1瓶（50ml），用于洗板7、底物液A：1瓶（7ml），过氧化脲8、底物液B：1瓶（7ml），四甲基联苯胺9、终止液：1瓶（7ml），2M硫酸10、说明书一份11、质检报告一份12、盖板膜一张使用单位需自备的设备及试剂设备：┅┅微孔板酶标仪(450nm/630nm)┅┅均质器┅┅氮气吹干仪或旋转蒸发器┅┅振荡器┅┅离心机┅┅电子天平┅┅刻度移液管（10ml）、洗耳球┅┅微量移液器：单道20μl ~200μl、100μl~1000μl                多道50μl~300μl试剂：┅┅乙腈（分析纯）┅┅无水甲醇（分析纯）┅┅去离子水溶液配制1) 样品稀释液：取150ml无水甲醇，加去离子水850ml，混匀。密封后可在2-8℃保存三个月。2) 1×洗涤工作液：取50ml 10×浓缩洗涤液，加去离子水450ml，混匀。可在2-8℃保存三个月。 待测样品处理方法1、蜂蜜、鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肉（稀释系数5）；牛肉、猪肝、鸡肝（稀释系数10）：1)除去肌肉、肝脏或者肾脏中的脂肪，使用均质器进行匀浆；2) 称取1±0.01 g均质后的样品于50 ml离心管中；加入0.5 ml样品稀释液（见溶液配制1），充分振荡20秒；3) 加入4.5ml乙腈，立即振荡5分钟至组织完全分散；4) 静置10分钟，取1ml上清于离心管中（若液体浑浊则4000g离心5分钟），50-60℃氮气吹干；5) 加入1ml样品稀释液，低速振荡30秒；6) 鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肉和蜂蜜样品，直接取50µl上清进行检测；牛肉、猪肝、鸡肝样品取200µl上清与200µl样品稀释液，充分振荡30秒后，取50µl进行检测。2、纯牛奶（稀释系数10）：1) 纯牛奶样品，充分平衡至室温(20-25℃)；2) 取100µl于1.5ml离心管中，加入 900µl样品稀释液，充分振荡20秒；3) 取50 µl进行检测。注意事项                               1) 使用前将试剂盒回升至室温（20-25℃）。2) 严格按说明书操作，不得改变加样顺序及温育时间，每加一种试剂前需将其摇匀。3) 尽量缩短加样时间，加入相同试剂或样品时应使用多道微量移液器。4) 洗板应保持一致性，不可更改冲洗次数。洗涤后，避免微孔干燥，否则可能会造成标准曲线不成线性或重复性不好的现象。5) 若底物液B有任何颜色表明其变质，应当弃之。0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A_450nm<0.5）时，表示试剂盒可能变质。6) 若酶标板底部被污染，则在读数之前用软纸轻轻擦试微孔板底部，防止因污染而影响读数结果。7) 在所有恒温孵育过程中，要避免光线照射，应用盖板膜盖住微孔板。8) 没有用完的微孔板应存放回有干燥剂的密封袋内，2-8℃密封干燥保存，试剂盒避免冷冻。9) 不要使用过期的试剂盒及各组份，不要同时使用不同批号试剂盒中的试剂。酶免分析步骤1、将标准品和样品对应的微孔编号，每个标准品和样品做双孔平行，并记录标准品和样品的位置。2、在标准品孔中加入50µl各标准品溶液，在各样品孔中加入50µl样品溶液。3、在所有孔中加入50µl的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡混匀，25℃环境中避光反应30分钟。4、小心揭开盖板膜，甩干孔中液体，用稀释好的洗涤工作液（250μl/孔）充分洗涤微孔板3次，在吸水纸上拍干（拍干后未清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。5、在所有孔中加入100µl的酶结合物，用盖板膜封板，轻轻振荡混匀，25℃环境中避光反应30分钟。取出酶标板，按步骤4洗板5次。6、洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl底物液A，再加 50µl底物液B，轻微晃动反应板使之彻底混匀，25℃环境避光显色15分钟 (在颜色浅的情况下可适当延长反应时间，但总显色时间不要超过30分钟)。7、每孔中加入50µl终止液，轻轻晃动使之彻底混匀，在450nm（建议使用双波长450/630nm）下检测吸光度，结果在5分钟内读取。结果计算1、所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以第一个标准（0标准）的吸光度值（B₀）再乘以100%，即百分吸光度值。2、以标准品浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为喹诺酮类药物浓度的对数值，求得反对数即为测定液中喹诺酮类药物浓度C（ng/ml）。样本经过稀释时应乘以相应稀释系数。样品检测下限蜂蜜、鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肉：环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星…………约5 ppb诺氟沙星、盐酸沙拉沙星…………………约2.5 ppb甲磺酸达氟沙星……………………………约12.5 ppb甲磺酸培氟沙星……………………………约16 ppb盐酸双氟沙星………………………………约25 ppb牛肉、猪肝、鸡肝：环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星…………约10 ppb诺氟沙星、盐酸沙拉沙星…………………约5 ppb甲磺酸达氟沙星……………………………约25 ppb甲磺酸培氟沙星……………………………约32 ppb盐酸双氟沙星………………………………约50 ppb纯牛奶：环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星………约10ppb诺氟沙星、盐酸沙拉沙星………………约5 ppb甲磺酸达氟沙星…………………………约25 ppb甲磺酸培氟沙星…………………………约32 ppb盐酸双氟沙星……………………………约50 ppb交叉反应(特异性)环丙沙星…………………………100%   恩诺沙星…………………………100%诺氟沙星…………………………200%氧氟沙星…………………………100%盐酸双氟沙星……………………20%盐酸沙拉沙星……………………200%甲磺酸达氟沙星…………………40%甲磺酸培氟沙星…………………33%         准确度（回收率）鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肉和蜂蜜………90±15%牛肉、猪肝、鸡肝………………………90±20%纯牛奶……………………………………80±20%精确度试剂盒板内变异系数小于8%，板间变异系数小于10%。贮藏条件及保存期产品保存于2-8℃，自生产日期起12个月内有效。