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| Tb-3170 | 藻类膜蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 800 |
| Tb-3170A | 藻类膜蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,500 |
产品简介： 石蜡包埋组织是很重要的临床材料，研究其正常细胞和疾病相关的细胞，特别是癌细胞中标记蛋白的差异表达水平，对于判断癌化的进展，癌症的类型的判定，以方便于诊断和治疗有重要的意义，然而体外培养的细胞的蛋白差异表达水平并不能够真实反映体内细胞的真实状况，因此从石蜡包埋组织中提取蛋白并且加以研究有很重要的意义，本试剂盒通过特殊的快速脱蜡试剂和蛋白质抽提试剂，在两种不同的温度条件下温育，可以将被铰链的蛋白质释放出来，经过简单的离心步骤，上清中含有的蛋白经过沉淀洗涤和溶解后，可以用于 Western Blot ，SDS-PAGE，ELISA ，2D电泳，蛋白质芯片分析等，本试剂盒可以使用 50次左右。 产品特点： 1． 不含有去污试剂，适用于非染色的标本。 2． 适用于鉴定蛋白质生物标记物和 FFPE 全蛋白质组学分析。 3． 抽提得到的蛋白质可以直接用于 SDS-PAGE，Western Blot ，ELISA ，2D电泳等实验。 4． 也可以适用于甲醛浸泡的组织标本。 5． 不需要超速离心，可以同时处理多个标本。 试剂盒组成： 预处理试剂 A 100ml 预处理试剂 B 5ml 提取试剂 5ml 沉淀试剂 75ml DTT 80mg 注意：使用前将 DTT,完全溶解于提取试剂中,使用完毕后,剩余的溶液在 4度的环境中保存。 运输及保存条件： 所有试剂常温下运输，收到后 DTT 和提取试剂 4 度保存，盛装预处理试剂 A 的瓶子已经密封，请在使用后，将剩余的预处理试剂 A 倒入一个有内盖的瓶中，同时盖紧内外盖，以防止挥发。盛装预处理试剂 A，B 和沉淀试剂的瓶盖要盖紧，4度保存，同时避免火源。 操作步骤： 1．取两块大约 10-15μm 厚,100 mm2 石蜡包埋组织切片到 1.5ml 的干净离心管中，加入 1ml 预处理试剂 A ，高速涡悬震荡 30秒，室温静置 5 分钟，期间偶尔颠倒离心管数次。 2．加入 100ul 预处理试剂 B，涡悬震荡 10秒，再 10000rpm 离心 2 分钟，移去上下层的液体。 3．用 500ul 的双蒸水清洗脱蜡的组织两次，离心并尽量吸去液体，保留组织块沉淀。 4．加入 100 μl 提取试剂，盖上盖子，涡悬震荡数秒。 注意：使用前将 DTT,完全溶解于提取试剂中，使用完毕后，剩余的溶液在 4 度的环境中保存。 5．在电热消解仪或水浴锅中 100°C 加热 20 分钟，短暂离心一下，再用组织研磨棒将切片组织磨碎。 6．在电热消解仪或水浴锅中 60°C加热 2 小时,期间大约每 20分钟取出,震荡一次。 7． 4°C，12000rpm 离心 15分钟，小心将上清转移到一个新的 1.5ml 的干净离心管中。
8．加入 1ml 的沉淀试剂，涡悬震荡 10秒，在 4°C的环境中保持 10分钟。 9．4°C，12000rpm 离心 15分钟，去除上清保留沉淀。 10．加入 0.5ml 的沉淀试剂，涡悬震荡 10秒，在 4°C的环境中保持 10分钟，再 4°C，12000rpm 离心 15 分钟，去除上清，保留沉淀，在通风橱中将试管倒置在滤纸上，让残余的液体挥发干净。 11．将固体沉淀溶解于合适的缓冲液中，再4°C，12000rpm离心5分钟，收集上清，用于SDS-PAGE，Western blot 等实验。 注意：此上清中含有 DNA，RNA 残留，所以溶液有些发粘，加入少量的 micrococcal nuclease，benzonase 等消化，有助于减少粘性，但是即使不处理一般不会影响后续实验，用枪头将沉淀捣碎,同时加入含有 Thiourea ，Urea，NDSB-201 或其它强溶解能力的去污试剂的缓冲液有利于沉淀的完全溶解。 注意事项: 1．为提高石蜡包埋组织中蛋白质的回收效率,必须尽量减少在切片制作过程中甲醛固定时间，同时在石蜡包埋前彻底脱水，甲醛固定的时间越长,蛋白质的提取，回收效率越低。 2．尽量取用从石蜡包埋组织块中切取的薄片，或没有封闭到载玻片上的没有经过苏木精等染色的切片。 3．材料越新鲜或甲醛固定时间越短,蛋白质的回收效率越高。 4．提取试剂中含有含有刺激性的化合物，操作时要戴好乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服，防止吸入口鼻，沾染皮肤眼睛后，立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。 5．对于甲醛浸泡的组织样本，每次可以取 5-10mg 的组织样本，用双蒸水洗涤离心收集后后，直接从步骤 4开始操作。 6．提取的蛋白沉淀如果用于 ELISA ，RIA 等免疫实验，可能需要先进行抗原修复程序，但是如果用 Western Blot 或 Dot blot 实验，一般情况下没有必要。 7．本试剂盒只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果，概不承担责任。
| Tb-3166 | 冻存样本核蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 600 |
| Tb-3166A | 冻存样本核蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,000 |
| Tb-3167 | 植物核蛋白/细胞器蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 600 |
| Tb-3167A | 植物核蛋白/细胞器蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,000 |
| Tb-3168 | 酵母核蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 600 |
| Tb-3168A | 酵母核蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,000 |
| Tb-3169 | 植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 600 |
| Tb-3169A | 植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,000 |
| Tb-3170 | 藻类膜蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 800 |
| Tb-3170A | 藻类膜蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,500 |
| Tb-3171 | 线粒体蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 600 |
| Tb-3171A | 线粒体蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,000 |
| Tb-3172 | 植物线粒体蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 600 |
| Tb-3172A | 植物线粒体蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,000 |
| Tb-3173 | 植物线粒体膜蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 800 |
| Tb-3173A | 植物线粒体膜蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,500 |
| Tb-3174 | 细胞核膜蛋白提取试剂盒 | 50 assays | 800 |
| Tb-3174A | 细胞核膜蛋白提取试剂盒 | 100 assays | 1,500 |
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