小麦蛋白检测试剂盒酶联免疫法定量检测小麦蛋白成分编号:ZE/PR/W原理PROTEIN Wheat试剂盒是利用竞争性酶联免疫方法定量检测乳制品中小麦蛋白成分。测试的原理是:从样品里提取的小麦蛋白和包被在微孔上小麦蛋白竞争性地与特异性抗小麦蛋白抗体结合。抗原(小麦蛋白)和抗体反应结合成抗原-抗体复合物。一个标记有过氧化物酶的抗体(第二抗体)特异性的与第一抗体结合。此时,再加入过氧化物酶显色底物,就会发生反应,产生颜色。在450nm酶标仪读数。根据已知的标准品中小麦蛋白浓度,以及对应的OD值,便可画出一个标准曲线。由此标准曲线及其他样品的OD值,可以计算出样品中的小麦蛋白浓度。样品中的小麦蛋白浓度越高,最终的颜色就会越浅。此试剂的检测限是:0.26%(小麦蛋白比总蛋白)试剂盒组成- 96孔板,包被有抗原(8孔×12条)- 5瓶小麦蛋白标准品×10(0%,1%,2%,3%,4%,8%)- 1瓶第一抗体×20 First Antibody x 20- 1瓶耦合物抗体×100 Conjugate antibody x 100- 1瓶TMB显色液(即时使用) Substrate/chromogen (TMB)- 1瓶终止液(1M硫酸) Stop Solution- 1瓶缓冲液x 10 Buffer x 10- 产品证书 Product Certificate需自备的其他材料微量移液器(10-100ul和100-1000ul)酶标仪(450nm)旋转均质器(使用于25ml的小试管)分析天平处理和存放1. 试剂盒必须存放在4-12℃的环境,避免冷冻,避光保存。在正确的储存条件下,此试剂盒有一年保质期。2. 根据下一部分的指导准备各个试剂和样品。使用前即时准备,制备好后试剂不可久置。3. 未使用的多余试剂条必须密封存放在铝薄袋中。4. 稀释过的耦合物溶液可保存5天,请不要一次配制过多。5. 显色液对光很敏感,请避光保存。酶底物溶液是透明的,如果此试剂变色,说明已被污染,请丢弃。每次使用时都倒出所需的量到另一个清洁的容器来以免污染。6. 试剂盒操作过程必须按照说明书指示来严格执行,特别是孵育培养时间必须按照指示,一旦实验开始,必须不间断的把实验进行到最终。同时避免小孔干掉。7. 当实验进行过程中,微孔板必须在避光。8. 实验过程中避免微孔里产生小气泡,气泡会干扰OD读数。9. 过了保质期的试剂盒的性能无法保证。10.重要:ELISA实验结果的重现性很大程度上依靠冲洗步骤的效率和均一性,冲洗步骤的次数越多,结果的稳定性和可靠性越强。11.实验过程需要在室温(20-24℃)中进行。太高或太低的温度将产生非线性曲线以及低的OD值。
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