此培养基用于检测不动杆菌属和多重耐药不动杆菌。
一、储存
1.基础干粉需15-30℃保存。
2.增补剂需需在15-30℃保存。
3.MDR选择性增补剂需2-8℃保存。
二、组分
1.基础干粉
琼脂 15.0g/L
蛋白胨﹑酵母浸出物 12.0 g/L
盐分 4.0 g/L
色素 1.8 g/L
2.液体增补剂
生产调整因素 1.0 g/L
pH 7.0±0.2
3.MDR增补剂:5支选择性混合物。
(根据需要,可以进行经典配方的调整或补充。)
二、准备
1.取瓶内干粉,每3.28g溶于100ml蒸馏水或纯水中,可以根据需要按照比例扩大、缩小。
2.按照1g/L的比例,添加液体增补剂与上述溶液中,搅拌至琼脂完全溶解。
3.加热至100℃,并按常规不断搅拌,加热不能超过100℃。
4. 缓慢搅动,水浴冷却至45-50℃
选择性步骤:
如果目标物为多重耐药不动杆菌,需按照以下步骤添加MDR增补剂:
1.用5ml蒸馏水复溶每支MDR增补剂。
2.按照5ml/L的比例,把复溶的MDR增补剂加入到科玛嘉不动杆菌基础培养基中。搅拌至均匀。
注意:MDR增补剂溶液2-8℃下可保存两周。
将培养基倾注于已灭菌的培养皿中,使其凝固,在室温可保存一天或在冰箱里贮存两周(避光、干燥,2-8℃)。凝固后平板的颜色有轻微的变化,从黄色转变至浅橘色。
三、接种
1.如果平板放置在冰箱保存,使用前请先恢复至室温。
2.倾注样本至平板上(直接倾注或适当的肉汤增菌之后倾注)
3.需氧条件下37℃孵育18-24小时。
四.结果
初筛微生物 | 菌落色彩 |
不动杆菌培养基: 不动杆菌属 其它革兰氏阴性 革兰氏阳性及酵母菌 MDR不动杆菌显色培养基: MDR不动杆菌 非MDR不动杆菌 其它革兰氏阴性 革兰氏阳性及酵母菌 | 红色 绝大多数被抑制 绝大多数被抑制 红色 绝大多数被抑制 绝大多数被抑制 被抑制 |
注:最后的鉴定必须做补充实验。
★ 使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。