检测水产样本中孔雀石绿

本产品用于快速检测水产（鱼、虾）组织中的孔雀石绿，整个检测过程需要1个小时左右，适用于各类企业及检测机构。本产品检测限为3.0 μg/kg。

1、检测原理

孔雀石绿快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的孔雀石绿在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线上孔雀石绿－BSA偶联物的结合。如果样本中孔雀石绿含量大于3.0 μg/kg，检测线T比质控线C浅或者T线不显色，结果为阳性。反之，检测线T显色与质控线C线相当或者比C线深，结果为阴性。

检测水产样本中孔雀石绿产品组成

3、样品收集及处理

鱼、虾等水产收集于干净的容器或自封袋中；若不能及时送检，样本应该去除脂肪，用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎后，分装保存于-20℃下，忌反复冻融。

3.1 准备工作

第一次使用时，请把氧化剂复溶液全部倒入氧化剂瓶中，震荡摇匀后备用，于4℃避光保存，如果长时间不使用（超过一周），请于﹣20℃避光保存。

3.2 样品处理

⑴ 取一定量的水产样本（鱼、虾等）去除脂肪后，用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎；

⑵ 称取10 g已处理待测样品于50 mL离心管中。加入1瓶提取剂A和1包提取剂B，振荡混匀5分钟。

⑶ 4000转离心5分钟，取上清液8 mL至另一个50 mL离心管中，并加入1瓶萃取剂，轻轻混匀，4000转离心3分钟。

⑷ 另取1支10 mL离心管中依次分别加入1滴氧化剂、步骤⑶中下层有机相5 mL、1滴助溶剂，于60 ℃下，利用氮气或空气将溶剂吹干（吹干后残留约1滴液体）。

⑸ 加入1 mL正己烷后震荡混合1分钟，移液器准确加入250 µL样品复溶液，轻轻混匀。

⑹ 4000转离心1分钟（如果分层不明显可延长离心时间至5分钟）或静置至明显分层，取下层液体用于检测。

4、检测步骤

⑴ 测试前将未开封的检测卡及待检样品溶液恢复至室温。

⑵ 从原包装铝箔袋中取出检测卡和酶标孔，在半小时内使用。

⑶ 用移液器吸取待检样品溶液100 μL于酶标孔中，反复吹打至孔内红色物质完全溶解，等待反应10分钟；

⑷ 将检测卡平放，吸取孔内所有溶液滴加到加样孔中，加样后开始计时；

⑸ 反应5～8分钟根据示意图判断结果，其它时间判读无效；

阴性结果：T线比C线深，或一样深，表示样品孔雀石绿浓度低于其灵敏度；

阳性结果：T线比C线淡，表示样品孔雀石绿浓度高于其灵敏度；

无效反应: 如果测试结果C线未出现，表示此试剂已失效。