菌株特点:
1、 该菌为需氧芽孢杆菌,细菌繁殖体G兰氏染色阴性呈紫色,细菌芽孢孔雀绿着色。其细菌繁殖体对培养基要求低,在溴甲酚紫葡萄蛋白胨琼脂上生长良好,表面粗糙呈米黄色。
2、 最适生长繁殖温度为56℃-65℃,培养24h即可形成菌落,37℃下24h看不到菌落。
3、 本生物指示剂载体为高级滤纸片,染菌量为5×105--5×106cfu/片,封装在小纸袋内,热死亡时间为121℃,3.9min阳性,19min阴性;D10值1.3-1.9min,符合美国药典第十一版规定标准。
4、 该菌无毒,热抗稳定,在冰箱内4℃下保存一年抗力无明显下降,在常温(20℃左右)可保存1个月。
使用方法:
1、 该芽孢菌片使用时将装有菌片的小纸袋放在被灭菌的物品中心部位(每锅放置菌片数按卫生部规定)。
2、 灭菌后,在无菌操作下取出小纸袋中的菌片,投放到溴甲酚紫培养液管中。同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养液中作对照。
3、 56℃-65℃培养,48h观察结果,对照管为米黄色;若灭菌后菌片培养液颜色不变仍为淡紫色,为阴性(-),表示灭菌彻底;如变黄色为阳性(+),表示灭菌不彻底。
培养液成份和配制方法:
1、 成分:胰蛋白胨10g、葡萄糖5g、可溶性淀粉1g、蒸馏水1000ml、1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示剂1ml。
2、 配制方法:
(1)1.6g溴甲酚紫溶于98.4ml的95%酒精溶液中摇匀;
(2)把前四种成分溶解后,调解pH7.0-7.2,加入指示剂,摇匀;
(3)每管分装5ml,经121℃20min灭菌后,放4℃冰箱内保存,备用。
注意事项:
1、 防止指示剂中酒精挥发而使溴甲酚紫含量过高(溴甲酚紫含量过高后可抑菌生长);
2、 菌片灭菌后应及时取出培养;
3、 禁止菌片接触任何消毒剂及放射源以免影响抗力。