流行性乙型脑炎病毒IgG抗体定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【原理】本试剂采用亲和素-生物素化EEB纯化抗原预包被板ELISA原理,定量检测人血清/血浆中存在的乙型脑炎IgG抗体,并配以酶标记抗人IgG(H+L链)单克隆抗体作为标记物。加入TMB显色液后终止反应,在450nm波长测试各孔OD值,OD值的大小于待测抗体含量成正比。生物素系统的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。【用途】本试剂盒用于定量检测人血清/血浆、脑脊液中的乙型脑炎病毒IgG型抗体。当人体内IgG抗体达到0.5IU/ml时,即可具有保护水平。适用于乙型脑炎病毒既往感染的诊断和流行病调差。对既往感染和免疫状况的诊断具有重要参考价值。适用范围:既往感染的诊断和疫苗免疫效果监测。乙型脑炎病毒感染之鉴别诊断和药物疗效监测。【试剂组成】1、 生物素化EEB抗原预包被板 1块2、 阴性对照血清 1瓶3、 阳性对照血清 1瓶4、 标准品 0、0.2、0.5、1、5、10IU/ml5、 标本稀释液 1瓶(为蓝色液体,直接使用)6、 酶结合物 1瓶(为红色液体,直接使用)7、 30X浓缩洗液 1瓶(加蒸馏水1:30稀释使用)8、 显色剂A、B液 各1瓶9、 终止液 1瓶【操作步骤】1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。2. 加样:将待检标本用标本稀释液1:41(5ul-200ul)稀释(脑脊液以1:50稀释),分别加待检标本及阴阳对照100ul各一孔于反应板中,设空白对照一孔(加100ul标本稀释液),标准品每孔加100ul(设双孔)轻拍混匀。3. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。4. 加酶结合物:每孔2滴,混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。5. 显色:每孔加显色剂A、B各一滴,轻拍混匀(或振荡器混匀)后置37℃10分钟。【结果判断】1. 目测:在白色背景下观察各孔显色情况,兰色者为阳性,无色者为阴性。2. 酶标仪测定:每孔加终止液一滴,混匀后在450nm下测定各孔O.D值。以标准品含量为横坐标,相应O.D值为纵坐标,做标准曲线。以0.5IU/ml标准品为临界值,≧0.5IU/ml为阳性,<0.5IU/ml为阴性,阳性值可在曲线上查找具体含量。【注意事项】1. 微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余者封存置2-8℃。2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。3. 洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。4. 试剂置2-8℃存放,不能冻结,有效期10个月。5. 避免用溶血、浑浊或脂血标本。6. 最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48销售或-20℃冻存4周(标本应避光)。7. 本试剂盒的线性范围为0-10IU/ml,超出10IU/ml时,不能精确定量,只能以O.D值做参考。广州市宜康生物科技有限公司地址:广州市番禺区清河东路亚运大道6号6座8层电话:020-84458576传真:020-84456072技术支持:13078888903网址:www.yukonbio.com
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