配方:(g/L) | |||||||||||||||||
动物组织酶解物 乳白蛋白水解物 酵母浸粉 氯化钠 α-酮戊二酸 丙酮酸钠 偏亚硫酸氢钠 碳酸钠 pH值7.2 ± 0.2 | 10.0 5.0 5.0 5.0 1.0 0.5 0.5 0.6 25℃ | ||||||||||||||||
原理: | |||||||||||||||||
酵母粉提供氮源,维生素,生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;偏亚硫酸钠,丙酮酸钠提供必须的离子。 | |||||||||||||||||
用法: | |||||||||||||||||
称取本品 27.6g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,每瓶 100ml,121℃高压灭菌15 分钟,冷至 45 -50℃时,每瓶培养基中加入 5ml 无菌裂解脱纤维羊或马血和 1 支 Bolton 肉汤添加剂,混匀,备用。 注:培养基高压灭菌后有一些小黑色颗粒。 | |||||||||||||||||
质量控制: | |||||||||||||||||
在42±1℃培养24-48小时。
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配方:
1、基础培养基
成分:
动物组织酶解物 10.0g
乳白蛋白水解物 5.0g
酵母浸粉 5.0g
氯化钠 5.0g
丙酮酸钠 0.5g
偏亚硫酸氢钠 0.5g
碳酸钠 0.6g
α-酮戊二酸 1.0g
水 1000ml
制法
用水溶解基础培养基成分,如需要可使用加热促其溶解。将基础培养基分装至合适的锥形瓶内,121℃灭菌15min。
2、无菌裂解脱纤维绵羊或马血
对无菌脱纤维绵羊或马血通过反复冻融进行裂解或使用皂角昔进行裂解。
3、抗生素溶液
成分
头孢哌酮(cefoperazone) 0.02g
万古霉素(vancomycin) 0.02g
三甲氧苄氨嘧啶乳酸盐(trimethoprimlactate) 0.02g
两性霉素B(amphotercin B) 0.01g
多粘菌素B(polymyxin B) 0.01g
乙醇/灭菌水(50/50,体积比) 5mL
制法
将上述成分溶解于乙醇/灭菌水混合溶液中。
4、完全培养基
成分
基础培养基(A.1.1) 1000mL
无菌裂解脱纤维绵羊或马血(A.1.2) 50mL
抗生素溶液(A.1.3) 5mL
制法
当基础培养基的温度约为45℃左右时,无菌加人绵羊或马血和抗生素溶液,混匀,将完全培养基的pH值调至7.2士0.2(25℃),将培养基无菌分装至合适的试管或锥形瓶中备用。配制的增菌液在常温下放置不得超过4h,或在4℃左右避光保存不得超过7d。
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