本产品用于快速检测水产(鱼、虾)组织中的氯霉素,整个检测过程需要30分钟左右,适用于各类企业及检测机构。本产品检测限为 0.2 μg/kg。
1、检测原理
氯霉素快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,样本中的氯霉素在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上氯霉素-BSA偶联物的结合。如果样本中氯霉素含量大于0.2 μg/kg,检测线T比质控线C浅或者T线不显色,结果为阳性。反之,检测线T显色与质控线C线相当或者比C线深,结果为阴性。
品收集及处理
鱼、虾、蟹等水产收集于干净的容器或自封袋中;若不能及时送检,样本应该去除脂肪,用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎后,分装保存于-20℃下,忌反复冻融。
3.1 用于快速检测水产鱼虾组织中的氯霉素实验室方法
⑴ 取一定量的水产样本去除脂肪后,用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎;
⑵ 称取5 g已处理待测样品于50 mL离心管中;
⑶ 加入1瓶提取剂,震荡混匀10分钟;
⑷ 4000转离心10分钟,取上层液6 mL至10 mL离心管中,于60℃下,利用氮气或空气将溶剂吹干;
⑸ 移液器准确加入200 µL样品复溶液及加入1 mL正己烷复溶,震荡混匀1分钟;
⑹ 4000转离心1分钟(如果分层不明显可延长离心时间至5分钟),至少取150 µL下层液待测。(若下层液浑浊可用80℃加热5至10分钟即可改善)。
3.2 现场方法
⑴ 取一定量的水产样本去除脂肪后,用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎;
⑵ 称取5 g已处理待测样品于50 mL离心管中;
⑶ 加入1瓶提取剂,震荡混匀10分钟;
⑷ 取少量脱脂棉放入漏斗底部,将步骤⑶中处理样本倒入漏斗,过滤并收集滤液6 mL至10 mL离心管中,于60℃下,利用氮气或空气将溶剂吹干;
⑸ 移液器准确加入300 µL样品复溶液及加入1 mL正己烷复溶,震荡混匀1分钟;
⑹ 掌式离心机离心1分钟,至少取150 µL下层液待测。(若下层液浑浊可于80℃加热5至10分钟即可改善)。
4、操作步骤以及结果判读:
⑴ 测试前将未开封的检测卡及待检样品溶液恢复至室温;
⑵ 从原包装铝箔袋中取出检测卡,在半小时内使用;
⑶ 将检测卡平放,用塑料吸管垂直滴加4滴无气泡样本(约120 μL)于加样孔;
⑷ 反应7分钟后根据示意图判断结果,超过15分钟判读无效;
阴性结果:T线比C线深,或一样深,表示样品氯霉素浓度低于其灵敏度;
阳性结果:T线比C线淡,表示样品氯霉素浓度高于其灵敏度;
无效反应:如果测试结果C线未出现,表示此试剂已失效。