快速检测农药残留

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常条件下，胆碱酯酶（CHE）催化神经传导代谢产物类似物（碘化硫代乙酰胆碱ATCI或碘化硫代丁酰胆碱BTCI）水解，其水解产物与显色剂（二硫代二硝基苯钾酸DTNB）发生反应，产生黄色物质，用分光光度计或农残测试仪在412nm处测定吸光度的变化值（△A），计算出抑制率可以判断出样品是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药残留的存在。
 
使用方法
试剂准备：
1.取缓冲液试剂1袋，加入500ml蒸馏水或纯净水，溶解搅拌均匀，即得PH8.0缓冲液。
2.酶试剂已配成溶液可直接使用。使用时每次100ul。
3.在显色剂瓶中加入PH8.0缓冲液26ml，轻摇使完全溶解。使用时每次100ul。
4.在底物瓶中加入蒸馏水10.3ml，轻摇使完全溶解。使用时每次100ul。
 
样品准备：
1.样品不可用水冲洗，应擦去表面泥土等杂物后取样。为了保证取样具有代表性，叶菜一般取来自不同植株的叶尖部样本；果菜从不同个体的表皮处取样。
2.称取切碎或剪碎至1厘米见方左右的样本2.0g于小烧杯（或小三角瓶等其他容器）中，加入10ml PH8.0缓冲溶液，振荡1分钟或静置3分钟，过滤或静置取上清液。
 
测试：
1.空白对照测试：在小试管内先加入100ul酶，然后加入2.5ml PH8.0缓冲溶液，100ul显色剂，100ul底物，摇匀，迅速倒入比色皿中，用仪器进行测试。
2.样品测试：在小试管内先加入100ul酶，然后加入2.5ml样本提取液，100ul显色剂，混匀静置抑制10分钟后，立即加入底物100ul。摇匀，马上转移到比色皿中，放入仪器，进行测定。

测试结果判断
抑制率≥50%时检测结果为阳性，对于阳性样本要有2次以上重复检测。当抑制率达到50%以上，表明被测样品的农药残留毒性可能超过安全标准，请用气相色谱等仲裁方法确认。
 
注意事项：

1.试剂开封前应4℃冷藏，保质期1年。

2.酶试剂可直接使用。用后4℃冷藏，开启安瓿瓶后请在1月内使用完。

3.底物溶解后需0-5℃冷藏，用毕请立即盖好胶塞并在1月内使用完。

4.显色剂溶解后可室温保存，请在6个月内使用完。

5.用于移取试剂或样品的器具都要专用，避免交叉污染。

6.酶试剂是极易受到污染失活的试剂，因此，测试时，应先吸取酶试剂。不论酶试剂是否使用，都不能倒回去。否则，容易污染整瓶试剂造成酶试剂失效，产生错误的测试结果。