近日，中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所畜产品质量安全控制与溯源创新团队提出了一种基于核酸免扩增的分子杂交试纸条定量分析策略，成功实现了对乳品成分的准确定量检测。相关研究成果发表在《生物传感与生物电子（Biosensors and Bioelectrnics）》。
掺假和欺诈行为的严重程度将直接影响企业的非法所得，掺假的严重程度是法律量刑时考虑的重要因素。核酸因其良好的特异性和热稳定性，在加工乳制品的检测中应用广泛。然而，基于核酸扩增的检测方法多为定性检测，且操作繁琐，难以实现准确的定量分析。
该研究创新性地提出了一种基于胶体金侧流层析试纸条的免核酸扩增乳品成分定量检测方法。以乳品中含量丰富、稳定且种属特异的线粒体DNA作为检测靶标，设计单链DNA探针与其杂交。研究团队开发了一种类环介导等温扩增的方法，通过 Bst 酶的解旋和DNA聚合功能，结合杂交缓冲液，实现了靶标DNA双链的解旋和探针与靶标DNA单链的高效杂交，最大程度地减少了靶标互补链与DNA探针之间的竞争，有效克服了靶标DNA链互补链对检测的影响，提高了杂交的特异性和效率。同时，该方法能够有效的避免气溶胶污染的风险，并可实现对乳品的准确定量检测。该技术能够检测到乳品中低至1%（v/v）含量的牛奶，结合便携式试纸条扫描仪使用时，能够精确分析牛奶含量。这种无需扩增的核酸检测方法为乳品行业提供了一种高效且准确的乳品成分定量检测手段，为确保乳品质量和真伪提供了可靠的技术支持。
该研究得到了国家重点研发计划、中国农业科学院科技创新工程等项目的支持。
原文链接：https://doi.org/10.1016/j.bios.2024.116140
