日前,由珠江水产研究所宋红梅副研究员等发明的“一种橘色双冠丽鱼黑色素细胞的分离和培养方法”获得国家发明专利授权,专利号:ZL 2019 1 1342372.1, 2021.03.23授权。
本发明公开了一种橘色双冠丽鱼黑色素细胞的分离和培养方法,选用胰蛋白酶和胶原酶I共同处理,用胰蛋白酶预消化鱼体表组织,去除表皮细胞,再用胶原酶I配制的胶原酶溶液进行二次处理,结合不同滴度浓度的percoll分层,获得活力较高的色素细胞。已经成功传代10代,细胞可以维持良好的生长状态,而且可冻存和复苏。
动物色素细胞是动物体色形成研究的重要载体。因此,能否成功提取、分离和体外培养色素细胞是探究动物体色基因生物学功能的基础,也是了解鱼类体色形成和体色变异分子机理的前提。现有技术中,研究学者成功从哺乳动物如人、小鼠、羊驼和狐等皮肤分离和培养黑色素细胞,但难以从鱼体体表中提取分离色素细胞,目前还未见确切的鱼类某种色素细胞的单独分离培养相关报道。本发明中,分离黑色素细胞后,通过透射电镜观察黑色素细胞,细胞内部的喋呤体和类胡萝卜素囊泡完整,细胞内部结构完整,色素细胞结构完整,就要有很好的生物学功能,为利用体外培养的黑色素细胞研究鱼类体色形成的分子机理,为鱼类体色分子育种提供技术支持和奠定理论基础。