本实验的干酪乳杆菌，是在前期研究中使用化学方法筛选出的具有较好抗氧化能力的菌株。陕西理工大学生物科学与工程学院的陈佩、党辉拟通过HepG2细胞模型，研究干酪乳杆菌对氧化应激状态下细胞抗氧化活性的影响，为以后体内研究及抗氧化机理方面的研究提供参考。
结果与分析
H2O2对HepG2细胞存活率的影响
H2O2作为一种外源性活性氧，特别容易穿透细胞膜导致DNA损伤，这种损伤在适宜的保护剂作用下，还可以被修复。
与对照组相比，0.05 mmol/L浓度的H2O2对细胞存活率的损伤不显着，当H2O2浓度为0.10 mmol/L时，细胞存活率显着下降到80.74%（P＜0.05）。浓度为0.20、0.25、0.30 mmol/L时，细胞存活率与对照组相比都呈显着下降趋势（P＜0.05），并且细胞存活率与H2O2的剂量呈现负相关性。
干酪乳杆菌对HepG2细胞培养上清液抗氧化功能的影响
机体中清除自由基的系统主要包括超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）等抗氧化物质。过氧化物酶（POD）主要存在于细胞的过氧化物酶体中，对细胞具有保护作用。丙二醛（MDA）是脂质过氧化的产物，它的含量直接反映体内脂质过氧化程度。
与对照组相比，12 h时，模型组细胞上清液中的总抗氧化能力（T-AOC）有所下降但差异不显着，POD活力显着降低（P＜0.05），GSH-Px活力增加了54.09 U/mL，SOD、CAT活力和MDA含量无显着性差异，表明此时模型组细胞还未进入氧化应激状态。24 h后，细胞上清液中模型组的T-AOC比对照组显着降低了50%（P＜0.05），GSH-Px活力显着降低51%（P＜0.05），同时MDA含量显着增加130%（P＜0.05），表明此时细胞已表现为氧化应激状态。
与模型组相比，添加干酪乳杆菌12 h后，细胞上清液中的T-AOC、GSH-Px活力和CAT活力都有显着提高，分别提高了80%、30%和124%（P＜0.05），SOD活力有所提高，但并不显着（P＞0.05），POD活力显着降低了40%（P＜0.05），MDA含量增加了24%，表明干酪乳杆菌可以提高细胞抗氧化能力。24 h后，细胞上清液中的T-AOC和SOD活力显着增加了193%和139%（P＜0.05），GSH-Px、CAT和POD活力显着增加（P＜0.05），GSH和MDA含量分别显着降低了29%和63%（P＜0.05）。
干酪乳杆菌对HepG2细胞裂解液抗氧化活性的影响
添加干酪乳杆菌12 h后，与对照组相比，模型组细胞裂解液中SOD活力、GSH含量有所降低，但差异不显着（P＞0.05）；POD活力显着提高了109%（P＜0.05）。12 h后，乳杆菌组的细胞裂解液中SOD活力与对照组相比有所升高但无显着性差异（P＞0.05），与模型组相比显着增加了22%（P＜0.05）；POD活力与对照组相比显着增加了118%（P＜0.05），和模型组相比也有所增加；GSH含量与对照组相比无显着性差异（P＞0.05）。
24 h后，与对照组相比，模型组细胞裂解液中的SOD活力和GSH含量分别显着增加了43%和71%（P＜0.05）；POD活力也有所增加；乳杆菌组的SOD活力比对照组有所增加，但比模型组显着降低了20%（P＜0.05）；POD活力比对照组和模型组分别显着增加了129%和108%（P＜0.05）；GSH含量比对照组显着增加了83%（P＜0.05），与模型组相比也有所增加。
干酪乳杆菌对HepG2细胞形态学的影响
经过H2O2损伤后，细胞形态明显改变，显微镜下呈现致密浓染的块状凝聚强荧光，细胞皱缩，体积变小呈不规则形状。加入干酪乳杆菌后，细胞受损明显降低了56%，少数细胞发生凋亡，其细胞核发出强荧光，但大部分细胞形态正常，呈现均匀弥漫的荧光。
结 论
本研究结果表明，干酪乳杆菌对H2O2诱导的HepG2细胞氧化应激模型具有一定的抗氧化效果，可通过提高抗氧化酶活力以提高细胞的总抗氧化能力，从而减轻细胞的损伤。说明干酪乳杆菌是具有较好抗氧化功能的益生菌，下一步可进行动物体内的抗氧化研究。
