西南大学食品科学学院，食品科学与工程国家级实验教学示范中心，重庆市农产品加工及贮藏重点实验室的王祖文、杨忠敏、丁晓雯*等人利用低剂量（体积分数10%）四氯化碳（CCl4）橄榄油溶液联合高脂饮食建立小鼠肝纤维化模型，通过灌胃不同剂量桑叶生物碱，观察桑叶生物碱对肝纤维化小鼠肝功能、肝纤维化的改善作用，旨在为桑叶资源的合理利用以及作为保肝食品的开发提供理论依据。
1、桑叶生物碱对肝纤维化小鼠一般生长情况的影响
实验期间，正常对照组小鼠在饲养过程中状态良好；模型组小鼠精神萎靡、行动迟缓、皮毛不光滑、腹部微隆、食欲减退并伴有不同程度的腹泻；与模型组比较，阳性药物组及桑叶生物碱各剂量组小鼠状况均有所改善。
2、桑叶生物碱对肝纤维化小鼠体质量和肝脏指数的影响
与正常对照组相比，模型组小鼠体质量显着降低（P＜0.05），肝脏指数显着增加（P＜0.05），表明CCl4联合高脂饮食对小鼠体质量增长产生了影响，对小鼠肝脏造成了一定的损伤。阳性药物组和桑叶生物碱各剂量组小鼠体质量虽呈现不同程度的增长，但与模型组无显着差异（P＞0.05）；其中低剂量组与正常对照组之间无显着差异（P＞0.05）。与模型组相比，阳性药物组和桑叶生物碱各剂量组小鼠的肝脏指数均有所下降，其中阳性药物组趋于正常，与正常对照组无显着差异（P＞0.05）；桑叶生物碱高剂量组小鼠肝脏系数与模型组之间存在显着差异（P＜0.05），与阳性药物组之间无显着差异（P＞0.05），但显着高于正常对照组（P＜0.05）。
3、桑叶生物碱对肝纤维化小鼠血浆ALT、AST和ALP活力的影响
与正常对照组相比，模型组小鼠血浆ALT、AST、ALP活力均显着升高（P＜0.05），提示肝细胞受损，造模成功。与模型组比较，阳性药物组及桑叶生物碱各剂量组小鼠血浆ALT、AST、ALP活力均有不同程度降低；灌胃阳性药物水飞蓟宾45 d后，小鼠血浆ALT、AST、ALP活力分别下降了63.19%、60.29%、46.89%；桑叶生物碱高剂量组小鼠血浆ALT、AST、ALP活力分别下降了60.60%、54.85%、49.72%，且桑叶生物碱中、高剂量组与阳性药物组上述指标无显着差异（P＞0.05），但仍远高于正常对照组（P＜0.05）。
4、桑叶生物碱对小鼠肝纤维化程度的影响
与正常对照组比，模型组小鼠血浆肝纤维化标志物HA、LN、PC-III、IV-C质量浓度均显着升高（P＜0.05），表明CCl4联合高脂饮食诱导小鼠肝纤维化造模成功。与模型组比较，阳性药物组与桑叶生物碱中、高剂量组小鼠血浆HA、LN、PC-III、IV-C质量浓度均显着下降（P＜0.05）；灌胃阳性药物水飞蓟宾45 d后，小鼠血浆HA、LN、PC-III、IV-C质量浓度分别下降了18.06%、17.50%、20.82%、18.44%；桑叶生物碱高剂量组小鼠血浆HA、LN、PC-III、IV-C分别下降了12.01%、15.77%、17.55%、17.42%，其中LN、PC-III、IV-C质量浓度与阳性药物组无显着差异（P＞0.05），但与正常对照组比差异显着（P＜0.05）。
5、桑叶生物碱对肝纤维化小鼠血浆TP和ALB质量浓度的影响
与正常对照组相比，模型组小鼠血浆TP、ALB质量浓度均显着降低（P＜0.05），说明造模过程中CCl4和高脂饮食的联合作用造成了小鼠肝损伤，影响了肝脏蛋白质的合成、运输和释放。与模型组相比，阳性药物组与桑叶生物碱各剂量组小鼠血浆TP、ALB质量浓度均显着升高，其中，阳性药物组小鼠血浆TP、ALB质量浓度分别升高了26.36%、31.85%；桑叶生物碱高剂量组小鼠血浆TP、ALB质量浓度分别升高了26.50%、27.75%，与阳性药物组相比无显着差异（P＞0.05），与正常对照组相比差异显着（P＜0.05）。
6、桑叶生物碱对肝纤维化小鼠血浆TBil和DBil浓度的影响
与正常对照组比，模型组小鼠血浆TBil、DBil浓度均显着升高（P＜0.05），说明造模过程中CCl4和高脂饮食的联合作用造成了小鼠肝损伤，影响了肝细胞对胆红素的处理能力。与模型组比较，阳性药物组与桑叶生物碱各剂量组小鼠血浆TBil、DBil浓度均显着下降（P＜0.05）。阳性药物组小鼠血浆TBil、DBil浓度分别下降了45.46%、74.91%；桑叶生物碱高剂量组小鼠血浆TBil、DBil浓度分别下降了35.56%、74.50%，与阳性药物组相比无显着差异（P＞0.05），与正常对照组相比差异显着（P＜0.05）。
7、桑叶生物碱对肝纤维化小鼠血浆TC和TG含量的影响
与正常对照组比较，模型组小鼠血浆TC、TG含量均显着升高（P＜0.05），表明小鼠脂代谢出现异常。与模型组比较，阳性药物组（TG含量除外）与桑叶生物碱各剂量组小鼠血浆TC、TG含量均显着下降（P＜0.05）。阳性药物组TC、TG含量分别下降了32.44%、20.99%；桑叶生物碱高剂量组TC、TG含量分别下降了28.67%、23.76%，与阳性药物组无显着差异（P＞0.05），并且桑叶生物碱高剂量组TC、TG含量均显着高于正常对照组（P＜0.05）。
8、桑叶生物碱对小鼠肝组织病理变化的影响
正常对照组小鼠肝小叶结构清晰，肝细胞排列整齐，肝窦正常，细胞核结构清晰，无胶原纤维沉积；模型组小鼠肝小叶结构模糊，胞质疏松，胞核体积变小，肝细胞排列紊乱，纤维增生明显；与模型组比，阳性药物组和桑叶生物碱各剂量组小鼠肝小叶结构相对清晰，肝细胞排列较为整齐，胶原沉积减少，肝损伤明显减轻。
讨 论
桑叶生物碱对CCl4联合高脂饮食诱导的小鼠肝纤维化有较好的改善作用，且在本实验剂量与灌胃时间范围内与药物水飞蓟宾作用效果相近。该研究结果表明，桑叶生物碱具有抗肝脏纤维化的潜力，可为桑叶在保肝食品方面的开发利用提供理论参考。
