华中农业大学食品科学技术学院的张时馨、彭丽桃、杨书珍*等人从26 种以干扰细胞膜功能和能量代谢为主要作用机制的传统临床药物中筛选对扩展青霉具有显着抑菌效果的抗菌药物,并对其抑菌特性进行研究,以期筛选出有效控制扩展青霉的抗菌剂,为传统临床药物在采后水果防腐保鲜方面的应用提供理论依据。
1、扩展青霉抗菌物质的筛选
26 种传统临床药物对扩展青霉孢子萌发均表现出不同程度的抑制作用,但不同药物之间的抑菌活性具有较大差异。其中硝酸咪康唑、克霉唑、酮康唑、联苯苄唑、纳他霉素、5-氟胞嘧啶、依布硒6 种药物对扩展青霉表现出强烈的抑菌效果,半最大效应浓度(EC50)均小于2?μg/mL,其中硝酸咪康唑和联苯苄唑的EC50分别为0.02?μg/mL和0.04?μg/mL。而甲硝唑、洛伐他汀对扩展青霉的抑制效果相对较弱,EC50大于100?μg/mL。
在8 种唑类药物中,咪唑类药物硝酸咪康唑、克霉唑、酮康唑、联苯苄唑的抑菌效果最强,其次是三唑类的氟康唑,再次是苯并咪唑和硝基咪唑。4 种吩噻嗪类药物也表现出不同抑菌活性,奋乃静的EC50为4.998?μg/mL,远高于其他3?种药物。内酯类药物中,辛伐他汀的EC50为12.182?μg/mL,抑菌活性高于其他4 种内酯类药物,而洛伐他汀对扩展青霉则无明显抑菌效果。
2、联苯苄唑对扩展青霉菌丝生长的影响
联苯苄唑能显着抑制在固体马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基中培养的扩展青霉菌丝体的生长,且具有明显的浓度效应,其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)分别为6.4?μg/mL和12.8?μg/mL。同时,联苯苄唑处理显着降低了液体PDB培养基中培养的菌丝体生物量。对照组菌丝体生物量随着培养时间的延长均匀增加,而处理组菌丝体生物量增长缓慢,联苯苄唑处理12 h后均显着低于对照组(P<0.05)。
3、联苯苄唑对扩展青霉的抑菌稳定性的影响
pH 6.5~8.5时,联苯苄唑处理组菌饼直径与对照组无显着性差异(P>0.05),pH?3.5~5.5时,菌饼直径显着高于对照组(P<0.05)。表明联苯苄唑在中性及弱碱性条件下稳定,对酸敏感。在25、50、75 ℃时,联苯苄唑处理组与对照组菌饼直径无显着性差异(P>0.05),在4 ℃时,处理组菌饼直径显着低于对照组(P<0.05),表明低温能增强联苯苄唑的抑菌活性;而在100 ℃时,处理组菌饼直径显着高于对照组(P<0.05),表明高温下联苯苄唑热稳定性较低。在Zn2+、Fe3+的作用下,联苯苄唑处理组菌饼直径分别减小了32.52%和48.15%,表明Zn2+、Fe3+能增强联苯苄唑的抑菌活性,而K+、Mg2+、Na+、Ca2+处理组与对照组无显着性差异(P>0.05)。
讨 论
综上所述,本实验从26 种传统药物中筛选出了硝酸咪康唑、克霉唑、联苯苄唑、酮康唑、5-氟胞嘧啶、纳他霉素、依布硒等对扩展青霉具显着抑菌效果的药物,为新型杀菌剂的研究和“老药新用”提供了参考。此外,联苯苄唑具有稳定的抑菌效果,对‘皇冠梨’果实青霉病的显着抑制效果也表明其在果蔬采后病害控制中存在的应用价值,该研究为联苯苄唑在水果采后病害防治中的进一步研究提供了参考。