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臭氧处理对交链孢菌生长及其毒素积累的抑制作用

放大字体  缩小字体 发布日期:2019-12-16
核心提示:交链孢菌(Alternaria spp.)是污染农产品及其制品最普遍的真菌之一,广泛分布于自然界,其中互隔交链孢(Alternaria alternata)是主要的病原菌
   交链孢菌(Alternaria spp.)是污染农产品及其制品最普遍的真菌之一,广泛分布于自然界,其中互隔交链孢(Alternaria alternata)是主要的病原菌,其不仅能够侵染多种农作物,引起植物病害(如番茄黑斑病等),而且能够产生交链孢毒素。检出率较高的交链孢毒素包括细交链孢酮酸(TeA)、交链孢酚(AOH)、交链孢酚单甲醚(AME)等。交链孢毒素对动植物具有一定的潜在危害,其中AOH具有遗传毒性和致突变性,还可促使机体产生氧化应激反应。
 
  北京农业质量标准与检测技术研究中心,农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(北京)的姜 楠、王刘庆、王 蒙*等人不仅考察不同剂量的臭氧处理对体外互隔交链孢生长及产毒能力的影响;而且通过接种番茄研究臭氧处理后互隔交链孢在番茄活体内的致病能力及产毒情况,同时分析了臭氧对交链孢毒素的直接降解效果,以期为利用臭氧防控互隔交链孢侵染及其毒素积累提供参考。
 
  1、臭氧处理对互隔交链孢菌落直径的抑制
 
  结果可知,臭氧气体对互隔交链孢菌丝的生长有较大程度的延缓和抑制作用,处理组的菌落比对照组生长显着减慢(P<0.05)。同时可以看出,抑制作用与臭氧质量浓度有关,随着臭氧质量浓度的增加,其对互隔交链孢菌落直径的抑制作用明显加强,互隔交链孢菌丝生物量积累逐渐减小。在培养第7天,对照组的菌落直径为6.88 cm,此时臭氧质量浓度为10 mg/L的处理组菌落直径为5.58 cm,臭氧质量浓度为20 mg/L的处理组菌落直径仅为5.10 cm,显着低于对照组及低质量浓度的臭氧处理组(P<0.05),其对互隔交链孢生长的抑制率分别为18.9%和25.9%。
 
  2、臭氧处理对互隔交链孢菌丝及孢子形态的影响
 
  与对照相比,臭氧处理后的互隔交链孢形态发生异常。正常的互隔交链孢孢子呈完整、丰满的卵形、倒梨形或近似椭球形,表面光滑或具微刺,菌丝表面浓厚光滑,自然伸长。经10 mg/L臭氧处理30 min后互隔交链孢孢子发生很明显的凹陷、褶皱,菌丝变得干瘪、萎缩、粗糙,同时出现断裂的情况;臭氧质量浓度增大到20 mg/L时,菌丝和孢子形态异常程度也逐渐增大,除了明显的凹陷和褶皱外,孢子表面还发生破裂,菌丝更加干瘪粗糙,且出现不规则的折叠、皱缩,同时有些孢子和菌丝表面出现小囊泡,由此可见臭氧对互隔交链孢的菌丝及孢子的破坏作用与臭氧质量浓度有关。
 
  3、臭氧处理对体外互隔交链孢产毒能力的影响
 
  对照组互隔交链孢高产TeA(1.08 mg/cm2),AOH(0.071 mg/cm2)、AME(0.009 mg/cm2)含量相对较低。本研究结果表明臭氧处理可显着抑制A. alternata产TeA、AOH、AME这3 种交链孢毒素,且与臭氧质量浓度呈正相关。在低质量浓度臭氧(5 mg/L)处理时,TeA含量为0.88 mg/cm2,AOH含量为0.065 mg/cm2 ,均低于对照组,而AME不再产生。随着臭氧质量浓度的增加,TeA和AOH的含量也逐渐降低,当臭氧质量浓度增加至20 mg/L时,TeA含量减少至0.71 mg/cm2,与对照组相比减少了34.3%;AOH的含量减少至0.033 mg/cm2,比对照减少了53.5%。
 
  4、臭氧处理对互隔交链孢致病能力及产毒能力的影响
 
  随着生长时间的延长,互隔交链孢病斑直径逐渐扩大,臭氧处理导致病斑延伸较对照显着放缓(P<0.05),且不同质量浓度的臭氧处理组之间也表现出显着差异(P<0.05)。随着臭氧质量浓度的增大,互隔交链孢在番茄果实上生长受抑制程度逐渐增大,说明臭氧处理对互隔交链孢致病力有较明显的抑制作用,且臭氧质量浓度与致病力呈负相关。
 
  5、臭氧处理对交链孢毒素的降解作用
 
  结果可知。臭氧质量浓度、处理时间、毒素的初始浓度、水分含量、pH值等因素都会不同程度地影响臭氧降解真菌毒素的效果。另外,臭氧对真菌毒素的降解效果也与其结构和特性有关,臭氧具有强氧化作用,一般会攻击双键结构发生加成反应,也可能会破坏苯环结构。现有研究认为关于臭氧降解AFB1、DON、ZEN的机理主要为Criegee机制,但是关于交链孢毒素的臭氧降解产物鉴定、降解路径解析、产物安全性评价等方面还需开展深入研究。
 
  结 论
 
  臭氧技术可以作为农产品及其制品中互隔交链孢及其毒素污染的防治手段。本研究初步探索了臭氧技术对互隔交链孢及其产毒能力的影响,下一 步将深入研究臭氧抑制互隔交链孢产毒的机理,鉴定臭氧降解交链孢毒素的降解产物,解析降解路径并评价降解产物的安全性,以期为开展果蔬贮藏加工过程中利用臭氧防控交链孢毒素污染提供科学依据和技术支撑。
 
 
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