一、聚合物填料，聚合物填料多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等，其优点是在PH值为1—14均可使用。这类填料具有较强的疏水性，而且大孔的聚合物对蛋白质等样品的分离非常有效。其缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。
二、硅胶基质填料
1、正相色谱，正相色谱用的固定相通常为硅胶以及其他具有极性官能团胺基团，如(NH2，APS)和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷，氯仿，二氯甲烷等。
2、反向色谱，反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填料有：C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
三、其它无机填料，其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化由于其特殊的性质，一般仅限于特殊的用途。
上面教了大家如何选择色谱填料，其实光选好色谱填料是不够的，我们还要选择填料粒度，下面就教大家如何选择填料粒度。
如何选择填料粒度?目前，高效液相色谱柱厂家色谱填料粒度从1um到超过30um均有销售，而目前分析分离主要用3和5um填料进行。填料的粒度主要影响填充柱的两个参数，即柱效和背压。粒度越小，柱压越大，柱压的增加限制了粒度小于3um的填料应用。在相同选择性条件下，提高柱效可提高分离度，但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而，3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。与此同时，柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱，即相同的塔板数或分离能力，但是柱长更短，以缩短分析时间。另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色谱柱的压力。
对于如何选择高效液相色谱柱这个问题，一定要多了解色谱填料，只有了解它了，在高效液相色谱中，我们就能取得好的分离效果。
