(1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染;
(2)色谱柱头的填料被样品污染;
(3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂,形成结晶析出;
(4)流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。
解决办法如下:
(1)如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力,或者卸下色谱柱头,将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟,后再用纯水超声10分钟,重新装入色谱柱。
(2)如确定色谱柱头的填料被污染,将柱头螺丝卸下,挖出柱内前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔细修复后,重新安装上柱头螺丝。
(3)如确定定是盐结晶,用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。
(4)如果因pH值使用不当,很难恢复。
液相柱:
卡套柱的安装(不加预柱)
1.将卡套架套入柱芯
2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夹套(见左图)
3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片
4.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手拧紧
5.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端
6.连接到液相色谱仪,PEEK接头手拧即可;若为不锈钢接头应使用专用扳手
注意:
使用卡套柱时,两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清
洗,任何时候都不能将卡套取下来,否则会造成填料的流失。
卡套柱的安装(加预柱):
1.将卡套架套入柱芯;
2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套高于柱芯;
3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片;
4.将“子弹头”预柱放入卡套片内;
5.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手拧紧;
6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端
7.连接到液相色谱仪,PEEK接头手拧即可;若为不锈钢接头应使用专用扳手
更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片(同时可以修补色谱柱)
注意:
在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前,应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗,而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈,以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。
1.将修补工具中的2套入柱芯的顶端;
2.将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中,并顺时针方向旋转到旋紧;
3.一手握柱芯,另一只手轻轻地向外拉3,取出柱芯顶端的滤网;
4.用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料;
5.将新的填料用甲醇润湿,然后填入挖去的部位,压平;
6.照(左图)装上新的玻璃棉滤网,并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端;
7.柱芯顶端套上2,然后将滤网放入;
8.压紧,然后取下2,再用4将滤网的边缘压平