N-乙酰-半胱氨酸（NAC）是氧自由基清除剂，具有干扰自由基生成、清除已生成的自由基、预防DNA损伤、调节信号转导系统、抗细胞凋亡等作用。研究报道，抗氧化剂NAC能够降低毒性化合物引起的细胞损伤。NP作为一种环境内分泌干扰物，可对生殖系统产生危害，尤其是雄性生殖系统，但是其具体的作用机制还不清楚。另外，目前尚缺乏针对NP诱导机体损伤的干预治疗相关药物。因此，来自东莞理工学院化学工程与能源技术学院、科技创新研究院的刘晓珍和南昌大学、食品科学与技术国家重点实验室的聂少平、余强、谢明勇*等人通过检测细胞氧化应激和凋亡相关参数，用培养的Sertoli TM4细胞探索NP诱导生殖损伤的机制，探寻目前发育不全、男性生殖系统发育异常等疾病发病率明显增加的可能原因。另一方面，以NAC作为干预药物，探讨其对NP诱导的细胞损伤效应的干预作用，从而为NP生物危害的防治策略提供一定的参考。以期发现并评估NP对机体损伤效应的重要指标，为NP的风险评估、建立环境和食品中的控制标准提供依据，同时为NP诱导机体损伤的预防和治疗提供新的作用靶点。
1. NAC和NP对Sertoli TM4细胞存活率的影响
20μmol/L NP处理6 h对Sertoli TM4细胞无损伤作用。而与对照组相比，NP作用24 h能够显着降低Sertoli TM4细胞的相对存活率（P＜0.05）。经NAC预处理后再用NP作用于细胞，细胞相对存活率与对照组相比无显着性差异；同样地，与对照组相比，NAC组细胞相对存活率无显着变化，表明NAC预处理4 h对细胞无损害作用，并且能够减少NP引起的细胞损伤。
2. NAC和NP对Sertoli TM4细胞内ROS含量的影响
与对照组相比，20 μmol/L NP处理细胞24 h能够引起Sertoli TM4细胞内ROS含量极显着上升。与NP组相比，NAC预处理能够显着下调NP诱导的ROS生成量。
3. NAC和NP对Sertoli TM4细胞内抗氧化物酶活力和MDA含量的影响
与对照组相比，NP组细胞内的MDA含量极显着升高。NAC预处理后，细胞内MDA含量极显着减少，表明NAC预处理可减轻NP引起的Sertoli TM4细胞脂质过氧化。与对照组相比，NP组细胞内SOD、CAT活力极显着下降。与NP组相比，NP＋NAC组细胞内SOD、CAT活力极显着增加，表明NAC预处理可逆转NP引起的细胞内SOD、CAT活力下降。这些结果表明NAC具有保护NP对Sertoli TM4细胞的损伤作用，该保护作用与减少细胞内氧化应激的形成有关。
4. NAC和NP对Sertoli TM4细胞凋亡的影响
与对照组相比，Sertoli TM4细胞经20 μmol/L NP处理24 h后，凋亡细胞明显增加。用5 mmol/LNAC预处理Sertoli TM4细胞后，NP诱导的细胞凋亡率显着下降（P＜0.05），这表明NAC对NP诱导的细胞凋亡损伤具有保护作用。
NP组、NP＋NAC组、NAC组Caspase-3相对活力分别为对照组的（1.48±0.15）、（1.08±0.11）、（0.92±0.09）倍。NP处理激活了细胞内Caspase-3，表明NP可通过激活Caspase-3诱导细胞凋亡。而NAC预处理能够抑制NP诱导的Caspase-3活力的增加，进一步说明NAC能够抑制NP对Sertoli TM4细胞的凋亡诱导作用。
5. NAC和NP对Sertoli TM4细胞内JNK、ERK信号通路的影响
与对照组相比，NP能够显着增加ERK和JNK的磷酸化水平，表明NP激活了Sertoli TM4细胞内ERK和JNK细胞信号通路。进一步研究发现，NAC预处理能够降低NP诱导的ERK和JNK的磷酸化水平升高。结果表明，NP处理能够激活Sertoli TM4细胞内JNK和ERK通路，并且ROS参与了该过程，ROS清除剂NAC能够阻断这一过程。
结 论
与对照组相比，20 μmol/L NP处理24 h能显着降低细胞存活率（P＜0.05），同时诱导细胞内ROS生成，下调SOD和CAT活力，增加MDA含量，诱导Sertoli TM4细胞凋亡，增加Caspase-3相对活力，促进ERK、JNK蛋白磷酸化激活；与NP组相比，NAC预处理能够明显削弱NP引起的细胞内ROS生成，使SOD、CAT活力下调，MDA含量增加，Sertoli TM4细胞凋亡，Caspase-3相对活力增强，激活ERK、JNK信号通路。结论：NAC具有干预NP对小鼠Sertoli TM4细胞损伤的作用，这可能与NAC抑制NP诱导的细胞氧化应激和凋亡以及阻断ERK、JNK信号通路的激活相关。
