elisa测定的原理是使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。
由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。有时候会出现elisa试剂盒测定值与文献报道相差太大的情况，以下内容分析elisa试剂盒测定值与文献报道相差太大的几个原因：
一、同一种材料，不同处理、不同发育状态和不同器官其生化指标可能发生很大变化。因此，能够直接用来比较的文献资料本来就不多。
二、生化测定的首要目的是比较处理内和处理间该指标的变化。同时，要测定绝dui值，往往是很可能甚至不可能的。因此，追求的不是绝dui值而是相对值。
三、测定值如果与文献报道相差太大，首先应该检查单位是否一致，包括摩尔还是毫摩尔，是干重、鲜重还是蛋白质浓度，是分钟还是秒，等等。其次，检查计算是否有误？最后，如果相差不是数量级，通常是很正常的。
四、用不同测定方法和不同测定条件下得到的测定值可能存在很大差异。因此，如果测定方法不同，同一样品的测定值通常是不可以直接比较的。这也是建议使用人elisa试剂盒测定的理由之一。因为不同作者用同一试剂盒测定的数据才是可以相互比较的。
