来自山东师范大学生命科学学院的王聪、赵盼、周亚男和孙海基*等人用低、中、高剂量的黄酒和去多酚黄酒分别处理大鼠离体的小肠,观察黄酒对小肠收缩的影响,用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肠肌间神经丛乙酰胆碱转移酶(ChAT)和一氧化氮合成酶(NOS)蛋白的表达,探讨其可能的影响机制,进一步明确黄酒保健养生的功效和机制,为黄酒价值的提升和黄酒的推广提供科学依据。
1、黄酒对大鼠离体小肠运动的影响
低剂量的黄酒能降低大鼠离体小肠的收缩幅度和收缩频率,但与处理前相比较,无显着性差异。中剂量的黄酒处理后,小肠的收缩幅度明显降低,抑制率为58%,但对小肠的收缩频率无明显影响;而高剂量的黄酒处理完全抑制了大鼠离体小肠的收缩,抑制率为100%,这些结果暗示黄酒能明显抑制大鼠离体小肠收缩。
2、乙醇对大鼠离体小肠收缩的影响
低和中剂量的乙醇虽能降低离体小肠的收缩幅度和收缩频率,但与处理前相比较,无显着性差异。高剂量的乙醇处理后,小肠的收缩幅度明显降低,抑制率为47.5%,但对小肠的收缩频率无明显影响。暗示黄酒中的乙醇可能参与了对离体小肠收缩幅度的抑制作用。
3、去多酚黄酒对大鼠离体小肠收缩的影响
低剂量的去多酚黄酒能降低离体小肠的收缩幅度和收缩频率,但与处理前相比较无明显差异。中、高剂量的黄酒处理后,小肠的收缩幅度明显降低,抑制率分别为46.00%和56.10%。高剂量的去多酚黄酒能显着降低小肠的收缩频率和幅度,而中剂量的去多酚黄酒对小肠收缩频率无明显影响。结果表明去除黄酒中的多酚后,黄酒仍能明显抑制小肠的收缩幅度,但抑制作用降低。
4、黄酒对大鼠离体小肠肌间神经丛内ChAT蛋白表达的影响
在肠肌间神经丛中,AChE阳性神经元多聚集在一起构成神经节,神经元胞浆为淡黄色。与对照组相比较,黄酒处理后,小肠肌间神经丛ChAT阳性神经元数量显着减少。为了进一步确定黄酒对ChAT蛋白表达的影响,采用Western blot技术检测了ChAT蛋白表达量的变化,与免疫组化的结果一致,黄酒处理后,与对照组比较,小肠肌间神经丛ChAT蛋白的表达明显降低。
5. 黄酒对大鼠离体小肠肌间神经丛内NOS蛋白表达的影响
NOS为神经递质一氧化氮的标志酶。在肠肌间神经丛中,免疫组织化学染色显示大鼠肠肌间NOS阳性神经元大小不一,胞质染色呈强度不等的棕黄色。与对照组相比较,黄酒处理后,小肠肌间神经丛NOS阳性神经元数量极显着增加。为了进一步确定黄酒对NOS蛋白表达的影响,采用Western blot技术检测了NOS蛋白量的变化,与免疫组化的结果一致,黄酒处理后,与对照组比较,小肠肌间神经丛NOS蛋白的表达明显升高。
结 论
与黄酒处理前相比较,中、高剂量(黄酒体积分数分别为3.5%、10.0%)的黄酒能明显抑制大鼠离体小肠的收缩幅度,抑制率分别为58%和100%;而中剂量的乙醇对离体小肠的收缩无明显的影响,高剂量的乙醇能显着抑制离体小肠的收缩幅度(抑制率为47.5%)。与处理前比较,经中、高剂量去多酚黄酒处理后,离体小肠运动幅度明显降低(P<0.05),抑制率分别为48%和67%。黄酒组肠肌间神经丛ChAT蛋白的表达量显着减少,而NOS蛋白的表达量显着增加。结论:黄酒对离体小肠收缩有明显的抑制作用,其作用与黄酒中的乙醇和多酚成分有关。黄酒可能通过抑制肌间神经丛中兴奋性神经递质乙酰胆碱的释放,促进抑制性神经递质一氧化氮的释放,而导致离体小肠的收缩受到抑制。黄酒能通过影响肌间神经丛内神经元的活性,抑制小肠运动,减缓胃肠机能亢进,为黄酒的保健功能研究及推广提供了理论依据。