来自北京市生物活性物质和功能食品重点实验室、北京联合大学生物化学工程学院的魏俊、赵范范、刘馨君和商迎辉*等人用TM处理创建SH-SY5Y细胞损伤模型，用不同浓度的玉米黄素对损伤模型进行预处理或后处理，测定细胞存活率和细胞毒性，来研究玉米黄素对内质网应激引起的细胞损伤的保护作用，为开发玉米黄素的功能性食品及AD等神经退行性疾病的治疗提供科学依据。
1、TM损伤浓度的筛选
不同质量浓度TM对SH-SY5Y细胞的生长均有一定抑制作用，且细胞存活率随TM质量浓度的升高呈下降趋势。与空白组相比，TM质量浓度为2 μg/mL时开始出现极显着抑制作用（P＜0.01），当TM质量浓度为4、6 μg/mL时，SH-SY5Y细胞的存活率分别为68.97%和47.73%，因此可选择两者的中间质量浓度5 μg/mL作为后续实验的损伤处理质量浓度。当TM质量浓度太低时，不能有效抑制细胞增殖，而TM质量浓度过高则会引起细胞死亡过量，因此建立细胞损伤模型时，选用5 μg/mL TM处理36 h。
2、玉米黄素浓度的筛选
为检测玉米黄素对SH-SY5Y细胞的保护作用，用不同浓度的玉米黄素预处理6 h后再加入5 μg/mL TM。2、5、10 μmol/L的玉米黄素预处理组细胞存活率均高于TM损伤组，其中5 μmol/L时存活率显着升高（P＜0.05），但玉米黄素浓度为20 μmol/L时细胞存活率（65.20%）低于损伤组（70.75%），且玉米黄素浓度为100 μmol/L时细胞存活率极显着低于损伤组（P＜0.01）。说明玉米黄素浓度过高对细胞会有损伤作用，因此，选择后续实验的玉米黄素浓度为2、5、10 μmol/L，5 μmol/L最佳。
3、玉米黄素预处理对细胞活性的影响
玉米黄素预处理1、2 h的细胞存活率与TM损伤组相比无明显变化（P＞0.05），玉米黄素预处理3、4 h后细胞存活率高于TM损伤组，其中预处理4 h有显着性差异（P＜0.05），玉米黄素预处理5、6 h后细胞存活率均显着高于TM损伤组（P＜0.05），其中预处理6 h的保护作用更加明显（P＜0.01）。与TM损伤组相比，玉米黄素预处理12 h后细胞存活率显着升高（P＜0.05），与预处理6 h组一样，当玉米黄素浓度为5 μmol/L时，细胞存活率的升高具有极显着差异（P＜0.01），预处理12 h后的细胞存活率开始下降。因此，玉米黄素预处理的时长对细胞活性也有一定的影响，预处理时长为4～12 h，玉米黄素（5 μmol/L）均能缓解TM导致的细胞存活率降低作用，其中玉米黄素5 μmol/L预处理6 h效果最为显着。
4、玉米黄素后处理对细胞活性的影响
为探究玉米黄素能否逆转TM引起的细胞损伤，SH-SY5Y细胞先用5 μg/mL TM培养30 min，再用2、5、10 μmol/L的玉米黄素后处理24 h，存活率检测结果显示，单独TM损伤30 min的细胞存活率下降了14.1%（P＜0.001），而玉米黄素后处理组的细胞存活率均显着高于损伤组（P＜0.05）。此结果说明，玉米黄素不仅能减轻TM引起的细胞损伤作用，并且在一定程度上可逆转TM引起的损伤。
5、玉米黄素预处理对细胞毒性的影响
TM损伤处理后，胞浆内LDH的释放率（培养液中的LDH活力）较空白组极显着增加（P＜0.01）。之前结果显示预处理6 h对细胞存活率的保护作用最佳，因此选用玉米黄素的预处理时间为6 h。与损伤组相比，2、10 μmol/L玉米黄素预处理组LDH释放率均降低（P＜0.05），5 μmol/L处理组LDH释放率极显着低于损伤组（P＜0.01），说明玉米黄素能拮抗TM对SH-SY5Y细胞的应激损伤。
6、玉米黄素后处理对细胞毒性的影响
与空白培养液组相比，TM损伤组细胞培养液中的LDH释放率显着升高（P＜0.05），表明TM使细胞受损引起了LDH外漏。与TM损伤组相比，玉米黄素各剂量组细胞培养液中LDH释放率有所下降，其中2、5 μmol/L玉米黄素后处理组下降显着（P＜0.05），表明玉米黄素后处理可以减缓细胞膜受损程度，阻止细胞内LDH外漏。10 μmol/L玉米黄素处理后LDH的释放率较损伤组虽有下降，但无显着性差异。
结 论
TM质量浓度在2 μg/mL以上时，可显着降低SH-SY5Y细胞活性（P＜0.01）；与TM损伤组相比，2～10 μmol/L玉米黄素预处理可显着提高细胞存活率（P＜0.05），降低LDH的释放率，先用TM处理30 min后再加2、5、10 μmol/L的玉米黄素处理24 h的玉米黄素后处理组结果相同。因此，TM通过诱导内质网应激可引起细胞损伤，玉米黄素能够减轻该损伤作用，并且在一定程度上可逆转TM引起的损伤。
