黑龙江八一农垦大学农学院的贾鹏禹、孙 蕊、郑殿峰*等人在预实验中通过对37 种脂肪酸甲酯混合标准品测试发现BID对脂肪酸甲酯类化合物具有较高的灵敏度及良好的线性范围,有望能通过此检测器提升或改进原有方法,因此本实验拟在深入比较BID和FID对脂肪酸检测性能的基础上,结合实际样品的检测要求,采用BID建立绿豆中脂肪酸组成分析方法,实现通过少量样品即可满足脂肪酸快速分析的目标。
1、气相色谱仪系统校正结果
在最终的系统校正条件下,BID基线噪声值为74.00 μV,漂移值为1 233.36 μV。色谱标准物质正十二烷、正十四烷和正十六烷平均保留时间分别为2.095、3.234 min和6.024 min,平均峰面积分别为1 648 536、1 655 980和1 643 613,其中第3个峰正十六烷保留时间相对标准偏差为0.006%,峰面积相对标准偏差为0.405%。
2、系统适应性结果
色谱系统对组分分离状况良好,BID对溶剂和37 种脂肪酸甲酯的信号响应正常,对各组分出峰几乎无歧视效应,说明BID作为气相色谱一种通用型检测器对脂肪酸甲酯具有良好的系统适应性。22.5 min后的基线漂移由程序升温引起,可通过扣除空运行获得的背景文件达到平直状态,满足定量要求。
3、BID与FID对组分信号响应能力的比较
峰面积归一化结果表明,2 种检测器的测试准确性相当,说明BID对各组分响应能力相当,几乎无组分歧视。单因素方差分析结果表明,2 种检测器对各组分峰面积数据的差异均显着,对各组分峰面积归一化数据除花生酸和二十碳二烯酸外均差异不显着,对花生酸和二十碳二烯酸2 种组分的响应表现为增强,其原因可能在于BID对高碳数脂肪酸甲酯的离子化效率更高。
4、方法学考察结果
BID对目标组分表现出较高的灵敏度和良好的线性响应范围。方法中各组分相对标准偏差在1.04%~1.35%之间,具有较高的重现性,证明采用微型样品前处理方法在BID高灵敏度的线性区间内具有较好的方法适应性。
结 论
本研究基于BID气相色谱技术并采用微型样品前处理建立绿豆中脂肪酸组成测定方法,该方法检测器系统适应性强、灵敏度高、色谱柱组分分离选择性好。与以往研究报道相比,由于采用高灵敏度检测器,能够测出原粮中5 种常见脂肪酸之外的3 种微量组分,且对微量组分检测的峰面积相对标准偏差均小于1.35%,证明其灵敏度和稳定性与质谱检测器相当;采用微型样品前处理所需固体样品量达到毫克级,能满足珍贵样品的分析检测,在实际应用中,本方法可实现单一绿豆植株不同结荚点内绿豆的脂肪酸组成分析,提高研究层次;实验试剂消耗少,所用甲酯化试剂及溶剂约为文献报道所用量5%~20%,且试剂为低值试剂,可节约分析成本;样品前处理流程简单、快速、通量高,单一样品前处理流程可在15 min内完成,提高了分析效率。本研究所建方法可为作物栽培、种质资源及食品科学研究提供技术保障,可拓宽BID的应用范围,为其在微量或痕量有机物分析方法学领域提供实践基础。