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牛源性非O157大肠杆菌的分离与鉴定

放大字体  缩小字体 发布日期:2019-04-22
核心提示:在致病性大肠杆菌中,大肠埃希氏菌O157:H7感染剂量低、致病力强、危险性大、临床症状严重,其污染和危害已成为全球性广泛关注的公共卫生问题。
   在致病性大肠杆菌中,大肠埃希氏菌O157:H7感染剂量低、致病力强、危险性大、临床症状严重,其污染和危害已成为全球性广泛关注的公共卫生问题。然而,由于长期以来缺乏相应有效的检测方法,人们更多关注O157,而非O157(non-O157)的危害性被低估甚至忽视。近年来国际上已越来越重视非O157的安全性,一些非O157对公众健康的威胁甚至高于O157。
 
  来自南京师范大学金陵女子学院的禹金龙、王娴静、江 芸*和江苏省疾病预防控制中心的董晨等人调查牛粪和牛肉样本中非O157大肠杆菌的污染情况,并对大肠杆菌O157及非O157(O26、O121)进行分离鉴定,对阳性菌株进一步进行毒力基因(stx1、stx2、eae、hly)检测。目前国内鲜有关于非O157大肠杆菌污染情况的报道,本实验将为非O157大肠杆菌的食品安全和风险评估提供科学依据。
 
  1、样品O血清型检测结果
 
  202 份样品多重PCR检出一条或多条阳性条带的样品共40 份(19.8%),牛粪阳性检出率为24.8%(38/153),牛肉阳性检出率为4.1%(2/49),牛粪检出率高于牛肉。其中非O157检出率为19.3%(牛粪37+牛肉2,39/202),O157的检出率为0.5%(牛粪1+牛肉0 , 1 /202)。153 份牛粪样本中,总阳性样本38 份,O26有32 份,占20.9%,O121有7 份,占4.6%,O103有5 份,占3.2%,O157仅有1 份,占0.6%,49 份牛肉样品中仅发现2 份O26样本阳性,占4.1%,结果表明牛粪和牛肉中非O157大肠杆菌的阳性率均高于O157。
 
  2、菌株鞭毛抗原分型
 
  经图谱对照及血清凝集实验验证, 在O26中,O26:H11是主要污染菌株,占59.1%(13/22),其次是O26:H-,占22.7%(5/22),O26:H14与O26:H19均占9.1%(2/22)。2 株O103鞭毛抗原均为H2。5 株O121中,3 株为O121:H19,另2 株则为O121:H-。1 株O157为O157:NM。
 
  3、毒力基因检测结果
 
  结果可知,分离自牛肉的2 株O26:H11,1 株stx1、hly阳性(泳道3),另1 株hly阳性(泳道4),而牛粪分离菌中,仅发现1 株O26:H11菌株呈现hly阳性(泳道6)。因此,30 株菌株中带毒菌株阳性率为10.0%(3/30),非O157 STEC阳性率为3.4%(1/29)。
 
  讨 论
 
  近年来, 关于非O 1 5 7 S T E C , 尤其是“ b i g s i x”STEC爆发流行的报道逐渐增多,国外尤其是发达国家对大肠杆菌“big six”的关注度越来越高,据美国疾病预防控制中心2010年报告,在非O157 STEC中,患病率依次为O26(22%)、O111(16%)、O103(12%)、O121(8%)、O45(7%)和O145(5%),与O157患病率大体一致,表明非O157 STEC对人类的健康威胁不容忽视。然而我国对非O157 STEC尚未引起足够重视。大肠杆菌O157和非O157感染剂量低、致病力强,虽然不耐热,但肉在加工烹调过程中(如生熟未分开)、肉熟制后的包装过程、熟肉制品的再次切配等均可能存在交叉污染,因此在实际生产、销售及家庭加工过程中仍应该重视其安全防范。
 
 
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