来自暨南大学理工学院食品科学与工程系、广东省食品安全分子快速检测工程技术中心的冉国敬、蒋鑫炜、白卫滨*和广东工业大学轻工化工学院的黎浩仪等人拟通过中压制备液相色谱法从桑葚中快速制得较大量C3G单体。在对桑葚中的总花色苷进行乙醇浸提、大孔树脂初步分离后采用中压制备液相色谱柱对粗分离产品进行进一步分离纯化，从而制备出C3G单体，并通过HPLC和质谱（MS）进行纯度及结构确证。最终形成一种高效、简便、成本低廉的单体花色苷制备方法，为单体花色苷的分离纯化以及规模化生产提供良好的理论依据。
1、花色苷粗品的中压制备液相色谱分离纯化结果
系统在519 nm波长处检测到响应阈值超过300 mAU后自动开始进行洗脱液收集，最终收集到3 个色谱分离峰所对应的3 种洗脱液，洗脱时间分别为79～115、170～226、252～277 min，3 个峰之间分离程度较好，峰形单一，可继续进行下一步纯度和成分的鉴定工作。
2、HPLC分析及MS鉴定结果
峰1、2主要含有3 种物质，分别在8.1、27.1 min和29.1 min左右出峰；峰3相对比较杂乱，主要含有4 种物质，分别在8.1、27.1、29.1 min和35.9 min左右出峰。通过与C3G标准品的HPLC图对比发现，保留时间为27.1 min的物质与C3G标准品保留时间相对应，从而初步判定该物质为C3G。随着收集时间的延长，C3G纯度和比例逐步发生变化，在280 nm波长处4 个区域中的C3G纯度分别为98.72%、69.07%、66.62%和13.43%，其中1号区域C3G纯度达到98%以上，经Q3扫描发现1号区域组分单一，同时MS/MS也确证分子离子m/z 448.98即为C3G。最终选取1号区域作为切割收集区，单次即可收集到650 mL（13×50 mL）溶液，经旋转蒸发浓缩和真空冷冻干燥后成功制备出C3G单体。
结 论
3 个色谱分离峰中目的峰（峰2）经高效液相色谱和质谱确证为由矢车菊素-3-葡萄糖苷（C3G）和矢车菊素-3-芸香糖苷（C3R）组成，采用峰面积归一化法计算得到C3G纯度为73.56%；通过对峰2采用切割方式进行收集，C3G纯度达到98%以上，单次收集到C3G单体溶液650 mL。中压制备液相色谱法单次上样量大、步骤简洁、成本低廉，可为矢车菊素-3-葡萄糖苷单体的规模化生产提供一定的参考。
