研究发现，人体摄入的多酚约95%不能被小肠直接吸收，而是进入结肠，经肠道菌群代谢分解为更易被人体吸收的酚酸等小分子物质。因此，来自海南大学食品学院的杨光美、李武*和广东省食品质量安全重点实验室、华南农业大学食品学院的李桐云、张玉莹等人采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS/MS）仪对PCA2肠道菌群代谢物的组成进行了分析，并比较了其代谢产物的抗氧化活性，结果可以为原花青素肠道菌群代谢物的组成与活性研究，以及原花青素的开发利用提供依据。
1. PCA2的肠道菌群代谢
培养前6 h PCA2被肠道菌群代谢较快，6 h时PCA2的含量降低77.28%；6 h后PCA2的代谢速率开始下降，在12 h和24 h PCA2的含量分别降低84.99%和90.07%。灭活菌群培养24 h PCA2含量无明显变化。
2. 肠道菌群代谢物HPLC分析
PCA与肠道菌群共培养6 h后，有8 种主要新化合物生成。在培养12 h时，化合物3、4、8的含量明显增加，而化合物7没有被检测到。培养24 h时，新生成化合物相对含量与12 h时相比无显着变化。
3. 肠道菌群代谢物UPLC-Q-TOF-MS/MS分析
经质谱数据库比对与分析的结果显示，PCA2经肠道菌群代谢生成的化合物1的分子离子峰为151.02[M－H]-，主碎片峰分别为108.07、112.99、119.94，推断该化合物为对羟苯基乙酸。
代谢物2的分子离子峰为289.07[M－H]-，碎片峰分别为137.02、165.02、205.05、245.08等。碎片峰137.02和165.02为表儿茶素C环1、3键断裂和1、2键断裂产生；碎片峰205.05为表儿茶素B环失去2 个C2H2O基团产生；碎片峰245.08为表儿茶素A环失去[COO]-基团产生，推断该化合物为表儿茶素。
代谢物3的分子离子峰为165.06[M－H]-，碎片峰分别为107.03、121.07、149.01、151.01等。其中，碎片峰149.01为该化合物失去氧原子产生，149.01[M－H]-为3-苯基丙酸的特征离子峰；碎片峰121.07为该化合物失去[COO]-基团产生，121.07[M－H]-为苯甲酸的特征离子峰。分子离子峰165.06[M－H]-为3-（4-羟苯基）丙酸的特征离子峰，碎片峰主要有121.07、107.05、151.01、138.02等。
代谢物峰4的分子离子峰为577.13[M－H]-，碎片峰分别为541.15、424.86、291.09、535.20等。该化合物相对于PCA2分子离子峰的m/z增加了2，由PCA2水解产生。推断PCA2经肠道菌群代谢，其C2—O—C7键发生断裂，生成B 型原花青素二聚体。
代谢物6的分子离子峰为271.06[M－H]-，碎片峰分别为151.00、119.05。该化合物可能为PCA2 C2—O—C7键断裂生成表儿茶素，表儿茶素再失去一分子H2O产生。碎片峰151.00为该化合物A环断裂失去[COO]-基团，再失去一个苯环产生；碎片峰119.05为该化合物C环发生RDA反应，失去C8H8O3中性基团产生。质谱数据库比对与分析结果显示，该化合物是5,7,2’-三羟基黄烷。
代谢物峰5的分子离子峰为301.04[M－H]-，碎片峰分别为151.00、178.99、245.04。该分子离子峰为PCA2的C环发生RDA反应，失去相对分子质量为152的C8H8O3中性基团和一分子的苯环与[COO]-基团产生。代谢物峰7的分子离子峰为423.07[M－H]-，碎片峰分别为212.97、272.92等。分析为PCA2 C环发生RDA反应，失去C8H8O3中性基团产生。同时，HPLC的结果显示，该化合物在12 h和24 h消失，推测该化合物作为中间产物降解生成其他物质。
4. PCA2肠道菌群代谢物抗氧化活性
4.1 代谢产物的T-AOC
随着培养时间的延长，PCA2肠道菌群代谢产物T-AOC呈现先增加后缓慢下降的趋势。6、12 h和24 h代谢产物的T-AOC均显着高于0 h（P＜0.05），分别为0 h的2.01、1.96、1.71 倍；6 h与12 h代谢产物的T-AOC无显着差异；代谢24 h时，其产物T-AOC降低至6 h的84.53%。
4.2 DPPH自由基清除能力
6、12 h和24 h代谢产物DPPH自由基清除能力均显着高于0 h（P＜0.05），6 h DPPH自由基清除能力是0 h的2.16 倍，6、12、24 h代谢产物DPPH自由基清除能力无显着差异。
4.3 ABTS＋?清除能力
随着代谢时间的延长，PCA2肠道菌群代谢物ABTS＋?清除能力呈现先增强后下降的趋势。6、12、24 h代谢产物ABTS＋?清除能力均显着高于0 h（P＜0.05），分别为0 h的1.34、1.44、1.24 倍；代谢24 h时，其代谢产物ABTS＋?清除能力分别降至6 h和12 h的92.35%和85.16%。
结 论
随着菌群培养时间的延长，PCA2质量浓度逐渐降低，在6 h时PCA2的浓度降低77.28%，24 h降低了90.07%。PCA2经肠道菌群代谢主要产生8 种新化合物，经鉴定为对羟苯基乙酸、表儿茶素、3-（4-羟苯基）丙酸、B型原花青素、5,7,2’-三羟基黄烷和3 种未知结构化合物。PCA2肠道菌群代谢产物的抗氧化能力显着高于PCA2，其中代谢6 h时，其T-AOC、DPPH自由基和ABTS＋?清除能力分别提高了2.01、2.16、1.34 倍。肠道菌群代谢物在PCA2生物活性作用过程中具有重要作用。
