1. BP和YP分离纯化
绿变大蒜的色素通过AB-8大孔树脂分离，体积分数30%乙醇溶液洗脱得到了YP，体积分数50%乙醇溶液洗脱得到了BP，多次收集在440 nm和590 nm波长处有最大吸收的组分，分别得到BP和YP。
制备HPLC继续分离得到BP-1和YP-3，经过质谱测定其相对分子质量分别为359和365，推测其分子式分别为C19H17N4O2S和C16H11N2O6S。
2. BP-1和YP-3对HepG2的增殖抑制作用
BP-1和YP-3对HepG2细胞的生长均具有一定的抑制作用，且BP-1的抑制率最高为75.32%（半数抑制浓度为58.31 μg/mL），抑制作用大于YP-3（P＜0.05）。
3. BP和YP对荷瘤小鼠肿瘤生长状况、免疫器官指数及水食效率的影响
BP、YP连续灌胃14 d后，荷瘤小鼠的肿瘤质量高度显着低于模型组（P＜0.001），L-BP、M-BP、H-BP的抑瘤率分别为43.47%、46.67%和59.85%；L-YP、M-YP、H-YP 3 组剂量对肿瘤生长的抑瘤率分别为29.31%、34.85%、42.36%，呈剂量依赖性。实验结果表明当BP剂量为300 mg/kg时，具有较好的抑瘤效果，且BP相对YP，对肿瘤的生长抑制作用更明显。与模型组相比，BP和YP低、中、高3 组剂量均能高度显着升高其脾脏指数（P＜0.001）；M-BP、H-BP能显着升高胸腺指数（P＜0.01，P＜0.001），表明BP和YP均能一定程度增强机体免疫功能。与阳性对照组相比，H-BP给药后脾脏指数极显着升高（P＜0.01）。
由荷瘤小鼠的肿瘤体积变化可知，阳性对照组增长速率最慢，M-BP较M-YP变缓。另外，用水食效率来评价荷瘤小鼠生存质量，与BP和YP相比，经CTX治疗后的荷瘤小鼠的水食效率高度显着降低（P＜0.001），说明CTX虽然能够抑制肿瘤生长，但是会严重损害小鼠的健康状况。而绿变大蒜色素BP、YP可以不同程度地抑制H22荷瘤小鼠的肿瘤生长，并且相对CTX具有较低的毒性，能改善荷瘤小鼠的自身免疫功能和提高生存质量。
4. BP和YP对荷瘤小鼠血清中细胞因子水平的影响
与模型组相比，3 个剂量浓度的BP和YP都能够高度显着降低VEGF的表达（P＜0.001）。与模型组相比，BP 3 个剂量组的IL-2和TNF-α质量浓度显着升高（P＜0.05），H-BP对这2 种细胞因子的表达水平的提高效果最为显着（P＜0.001）；结果表明，BP和YP可以促进TNF-α和IL-2的分泌，抑制VEGF的表达，提高机体免疫水平。
5. BP和YP对荷瘤小鼠肝脏中SOD﹑CAT﹑GSH-Px、MDA和转氨酶的影响
与模型组相比，阳性对照组及BP、YP各剂量组SOD、CAT、GSH-Px活力显着升高（P＜0.01，P＜0.001），MDA含量高度显着降低（P＜0.001）；与阳性对照组相比，M-BP和H-BP的SOD、CAT﹑GSH-Px活力高度显着升高（P＜0.001）。与模型组相比，阳性对照组ALT和AST的活力极显着升高（P＜0.01），反映出化疗药CTX对小鼠肝肾的损害。
6. 肿瘤组织病理学分析
H&E染色的肿瘤组织病理分析结果表明，给药后大量细胞呈现出坏死状态。与模型组相比，给药组的肿瘤细胞表现出稀疏的粉红色的细胞质，细胞缩小或消失，细胞核染色变浅且排列疏松。肿瘤周边可见血管、纤维组织增生，少量炎细胞浸润。
结 论
与模型组相比，给予BP和YP后，荷瘤小鼠的肿瘤体积显着变小（P＜0.05），胸腺和脾脏指数显着升高（P＜0.05），且肿瘤生长速率变缓，能一定程度改善H22荷瘤小鼠免疫功能及抑制肿瘤生长；同时，提高抗氧化酶活力、降低MDA含量，减少肝脏炎症的发生；与模型组相比，给药组的IL-2和TNF-α的表达水平都显着提高（P＜0.05），VEGF的表达水平降低了63%左右。结论：绿变大蒜中的BP和YP具有一定的抗肝癌活性，为开发绿变大蒜功能食品提供了参考。
