CO2培养箱是在普通培养箱的基础上加入CO2，以此通过人工的方式生成部分微生物生长、繁殖所需的适宜环境。目前，CO2培养箱主要被用于细胞、组织及细菌的培养，是开展肿瘤学、免疫学、遗传学及生物工程等研究工作中所必须具备的重要仪器设备。那么，怎样才算是在正确地使用培养箱呢？
首先，培养箱应放置于位置比较平稳，并远离热源的地方，以防止温度波动和微生物的污染。
通常情况下，CO2培养箱的安装与调试CO2培养箱的正面有操作盘，盘上设有电源开关。在接通电源前，操作人员应按照使用说明书，在培养箱内加入一定的蒸馏水(所加入的水应含有一定量的消毒剂)，以免烧坏机器。
除此之外，CO2培养箱的操作盘上还有温度调节器(手动式和液晶显示盘)、CO2注入开关、CO2调节旋扭、湿度调节旋扭、温度显示盘、CO2显示盘和湿度显示盘、二氧化碳样品孔(用于抽取箱内的样品，以检测箱内的CO2是否达到显示盘上所显示的含量)和报警装置(超温报警灯)。注水过程中，当报警灯亮时，应停止加水，随后打开电源开关开始加温，将温度控制器调到所需温度。如若设备中水温过热，超温报警灯就会亮起，并发出报警声。
其次，培养箱的CO2给供的管子不能太变曲，以保证气态或液态的CO2给供保持畅通。一般选用CO2钢瓶，接上压力控制表即可。而CO2恒温培养箱湿度的调整，则需通过转动湿度调节旋扭完成。
最后，就是CO2含量的调零。当培养箱内温度和湿度稳定后(一般须三天)，旋动CO2 调节旋扭，使显示盘的数字调到0.00，过5分钟后如需要再重复调整，直到显示盘上的读数稳定为止。打开CO2注入开关 (注入灯亮)，将CO2设定值调到所需浓度，使浓度达到设定值浓度后(注入灯熄灭)，并至少维持10分钟。此后则由CO2控制器自动调节箱内的CO2含量。
