蜂花粉是蜜蜂从植物花药上采集花粉并添加了少量唾液后加工而形成的饼状物,素有“天然营养库”之称。蜂花粉作为传统药物和保健食品已经得到广泛应用。茶花粉是蜂花粉的一种,主产于中国,因其具有味甜可口、气味清香等特点,深受消费者的青睐。
来自西北大学食品科学与工程学院的彭国霞、赵浩安和刘清清等人测定了5个不同产地茶花粉中总酚和总黄酮的含量,采用体外法研究了茶花粉的抗氧化活性,在此基础上,以小鼠为实验对象,研究了茶花粉对酒精诱导的急性肝损伤的保护作用,旨在为蜂花粉保肝功能性食品的开发提供理论依据。
1. 总酚和总黄酮的含量
不同产地茶花粉的总酚含量没有显着性差异(P>0.05),但产自浙江的茶花粉的总黄酮含量最高并且显着高于湖南、安徽和四川3个省份(P<0.05),总黄酮含量依次为:浙江>江西>湖南>安徽>四川。结果表明产地不同,茶花粉的总黄酮含量也不同。
2. DPPH自由基清除能力
茶花粉的DPPH自由基清除率与其质量浓度呈正相关,其回归方程为y=94.936x+2.646(R2=0.9922),并且通过计算得出其半抑制浓度为0.50 mg/mL。结果表明茶花粉具有较强的DPPH自由基清除能力。
3. 茶花粉的FRAP
在本研究中,当Trolox的质量浓度在0.6~3.0 μg/mL时,对应的回归方程为y=0.1352x+0.0801(R2=0.9950),把实验结果带入该方程得出,1 g茶花粉的FRAP相当于(5.37±0.53)mg Trolox。
4. 对血清ORAC的影响
与阴性对照组相比,正常组和高剂量花粉组均能抑制荧光的衰减速率,说明小鼠血清本身具有一定的抗氧化能力。灌胃高剂量的茶花粉后小鼠血清的抑制荧光衰减速率效果明显高于正常组,表明长期给小鼠灌胃茶花粉能够增强小鼠血清的抗氧化能力。
5. 对血清氧化损伤的影响
相比于正常组,高剂量组的曲线下面积明显减小。表明长期灌胃茶花粉能够显着抑制Cu2+对小鼠血清脂蛋白的氧化修饰作用,抑制率为36.58%。
6. 对血清中AST等活力的影响
与正常组小鼠相比,模型组小鼠血清中AST和ALT的活力急剧上升,分别达到54.65、51.54 U/L,是正常组的2.30 倍和2.94 倍。在给小鼠灌胃茶花粉后,与模型组相比,高剂量组和低剂量组小鼠血清中AST及ALT的活力均显着降低(P<0.05),并且高剂量组AST及ALT活力分别降低了47.47%和45.83%。结果表明茶花粉有明显的保肝功效。
7. 对小鼠肝脏指数的影响
相比于正常组小鼠,模型组小鼠的肝指数显着增大(P<0.05)。在给小鼠连续灌胃7周水飞蓟素和茶花粉以后,相比于模型组小鼠,水飞蓟素组和茶花粉组的肝脏指数均显着降低(P<0.05),表明水飞蓟素和茶花粉均能缓解酒精对小鼠肝脏造成的损伤。
8. 对肝脏中MDA含量的影响
相比于正常组,模型组小鼠肝脏组织中的MDA的含量显着升高(P<0.05),给小鼠灌胃水飞蓟素和高剂量茶花粉均能够显着抑制MDA的形成(P<0.05),且高剂量组的抑制率为26.93%。表明长期给小鼠灌胃茶花粉能够增强小鼠体内的抗氧化防御系统,从而预防酒精对肝脏造成的氧化损伤。
9. 对肝脏中SOD等活力的影响
模型组小鼠肝脏组织中的SOD和GSH-Px的活力均显着低于正常组小鼠(P<0.05),表明过量摄入酒精会降低肝细胞中SOD和GSH-Px的活力。在给小鼠连续灌胃7周高剂量的茶花粉和水飞蓟素后,与模型组相比,阳性对照组和高剂量组小鼠肝脏组织中的SOD和GSH-Px活力均显着提高(P<0.05)。在低剂量组中,小鼠肝脏组织中SOD的活力亦显着提高(P<0.05)。结果表明,茶花粉能够增强小鼠肝脏组织中SOD和GSH-Px的活力。
10. 肝脏组织病理学染色观察
正常组观察到规则性的肝细胞形态。在模型组中,可以观察到肝细胞有明显的炎症浸润和气球样变性,并且出现肝细胞点状坏死,表明酒精对肝细胞造成明显的损伤。与模型组相比,高剂量组中肝组织的炎症因子明显减少,肝损伤明显减轻,但仍见轻微的气球样变。相比于模型组,在低剂量组中可以观察到肝组织的气球样变性明显减轻,但是仍然有大量炎症浸润。在阳性对照组中,可以观察到肝细胞排列整齐,仅有少量炎症因子出现,无明显肝损伤。
结 论
浙江茶花粉的总酚和总黄酮含量最高,分别为8.97 mg/g和3.01mg/g,并且具有较高的抗氧化活性。给小鼠连续灌胃茶花粉7周,小鼠血清氧自由基吸收能力显着增加(P<0.05),Cu2+诱导的脂质过氧化损伤显着改善(P<0.05)。与模型组相比,茶花粉组小鼠血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶活力显着下降(P<0.05),肝脏组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力显着上升(P<0.05),丙二醛含量显着降低(P<0.05)。组织病理学观察显示,茶花粉能够明显改善酒精引起的肝细胞损伤。本研究结果表明茶花粉不仅具有较强的抗氧化活性,还对酒精造成的急性肝损伤有明显的保护作用,可以作为一种保护肝脏损伤的功能性食品原料。