多糖是鲍鱼中重要的生理活性物质之一。皱纹盘鲍是我国所产鲍中个体最大者，为鲍类上品，不仅个大体肥，肉细味鲜，而且营养丰富，被称为“海味之冠”，是我国沿海鲍科最具经济价值的种类之一。来自集美大学食品与生物工程学院的王军玲、魏配晓、邱绪建等人通过蛋白酶酶解结合乙醇分级沉淀和DEAE-52柱层析分离获得AMP，对AMP及其分离组分的化学组成、单糖组成、紫外光谱、红外光谱、微观结构等理化性质进行测定，还分析了各组分对人体肝癌细胞HepG2和乳腺癌细胞MDA-MB-231的抑制活性，为鲍鱼功能性保健食品的开发提供理论参考。
1.多糖的分离
经DEAE-52阴离子交换柱层析分离后，用?0、0.1、0.3 mol/L的NaCl溶液洗脱后分别得到了AMP-1、AMP-2、AMP-3三个多糖组分，进一步提高NaCl浓度至1.0 mol/L时没有多糖被洗脱下来，收集的3 个多糖组分对应的得率分别为63.0%、8.6%和6.1%。AMP-1、AMP-2和AMP-3均为白色的粉末。
2.化学组成分析结果
AMP总糖质量分数达到了83.9%；本研究提取的AMP中蛋白质量分数仅为3.6%，表明蛋白酶解结合乙醇分级沉淀法提取多糖时可以除去大部分蛋白；AMP中仅含有少量的糖醛酸和硫酸基，表明AMP主要由中性多糖组成。
AMP经DEAE-52柱层析分离后，随着NaCl浓度的增加，所得组分中的多糖含量逐渐降低，而硫酸基和糖醛酸的含量却逐渐增加。
分离得到的AMP-1中的蛋白、硫酸基、糖醛酸含量均很低，是一种中性多糖，而AMP-2和AMP-3可能是糖蛋白，并含有一定量的糖醛酸和硫酸基。
3.单糖组成分析结果
各单糖标准品经PMP衍生化后可以很好地分离。鲍鱼肌肉粗多糖主要由葡萄糖组成，其含量达到92.6%。
4.碘液显色分析
AMP-1与碘液反应没有出现蓝色显色反应，逐渐增加碘液用量也未出现蓝色，但在同样实验条件下淀粉呈现明显的蓝色，表明AMP-1不是常见的淀粉。
5.紫外光谱结果分析
AMP及其分离组分在190～200 nm范围内均出现了多糖的特征吸收峰，但是在相同的质量浓度下，随着多糖样品中蛋白含量的增加。除此之外，AMP-2和AMP-3在280 nm附近都出现了明显的吸收峰，这有可能是酪氨酸、苯丙氨酸等芳香族氨基酸与多糖之间的共价结合导致的。
6.FTIR结果分析
AMP中在1731 cm-1 处仅有一个很弱的吸收峰，表明AMP中仅含有少量的糖醛酸。与AMP相比，AMP-1在1731 cm-1 附近没有出现吸收峰，而AMP-2和AMP-3在此处都具有明显的吸收峰。另外，与AMP相比，AMP-2和AMP-3在3600～3200 cm-1波数范围内的吸收峰发生了明显的蓝移。
AMP-2和AMP-3分别在1546 cm-1 和1544 cm-1 波数处出现了明显的N—H的变角振动吸收峰。AMP-3在1223 cm-1处的吸收峰是＞S＝O的伸缩振动峰，由于其他组分中硫酸基含量较低，所以只有AMP-3在此处出现了明显的吸收峰。
7.SEM观察结果分析
在放大500 倍时，AMP和AMP-1呈现类似于片状的结构，且AMP-1更加紧密、光滑。
8.AMP及其分离组分对人类肿瘤细胞系抑制率的影响
当样品质量浓度为1 mg/mL时，AMP对MDA-MB-231细胞的抑制率为16.9%。而AMP-1、AMP-2、AMP-3在1 mg/mL时对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为25.9%、0.7%、－8.5%。随着培养液中多糖质量浓度的增加，AMP和AMP-1对MDA-MB-231细胞的抑制率成上升趋势，当多糖质量浓度为8 mg/mL时，抑制率分别达到了66.5%和71.6%。但是，AMP-2和AMP-3在1～4 mg/mL范围内对MDA-MB-231细胞均没有表现出抑制活性，甚至对细胞生长有轻微的促进作用，AMP-2和AMP-3在8 mg/mL时对细胞的抑制率分别为25.8%和29.2%。
随着培养液中样品质量浓度的增加，AMP和AMP-1对HepG2细胞的抑制率呈上升趋势，当样品质量浓度为8 mg/mL时，抑制率分别达到了72.6%和72.5%。但是，在1～8 mg/mL的质量浓度范围内，AMP-2对HepG2细胞均未表现出明显的抑制活性，且随着样品质量浓度的增加对细胞的促进作用呈上升趋势，AMP-3对细胞的抑制率也没有显着影响。
AMP-1对两种癌细胞都具有良好的抑制效果，根据化学组成、单糖组成、紫外光谱以及红外光谱的结果可以发现，AMP-1的生物活性可能与多糖的纯度、单糖组成、糖苷键的构型等有关，但是它的结构特征对肿瘤细胞的抑制机制还有待进一步的研究。
结 论
AMP的总糖质量分数达到了83.9%。经DEAE-52柱层析分离后，AMP-1的总糖质量分数为83.8%，高于AMP-2（62.5%）和AMP-3（31.6%）。单糖分析的结果表明，AMP主要由葡萄糖组成，而AMP-1中基本只含有葡萄糖，AMP-2和AMP-3主要由葡萄糖和半乳糖组成，同时含有较多的氨基糖。化学组成、紫外光谱和红外光谱结果表明，AMP-1是一种纯度较高的α-构型的吡喃糖，而AMP-2和AMP-可能是糖蛋白。碘液染色结果说明AMP-1是一种非淀粉的葡聚糖。扫描电子显微镜结果显示AMP和AMP-1是片状结构，而AMP-2和AMP-3中含有较多的球状颗粒。AMP和AMP-1对MDA-MB-231细胞和HepG2细胞均表现出了良好的抑制活性。
