野阳合多作为地方野菜，价格低廉，含多种营养成分，其颜色呈紫色，推测其含有花色苷，但目前鲜有对野阳合花色苷的研究。来自四川大学轻纺与食品学院的苟安娜、潘新雨和四川大学华西公共卫生学院的柏丁丁等人采用酸化乙醇提取野阳合花色苷，测定花色苷含量并定性分析花色苷的组成，测定野阳合花色苷提取物（HAE）对2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的清除能力，通过测定细胞存活率、细胞膜脂质过氧化程度及细胞内活性氧簇（ROS）的水平，研究HAE对过氧化氢（H2O2）诱导的中国仓鼠肺细胞（V79-4细胞）氧化损伤的保护作用，为野阳合的进一步开发利用提供实验数据和理论依据。
1.总酚和花色苷含量
本实验中，野阳合多酚的含量为（0.65±0.21）g没食子酸/100 g md。野阳合花色苷的含量经测定为（81.38±1.45）mg矢车菊素-3-葡萄糖苷/100 g md。
2.HAE组成分析
HAE在520 nm波长处的色谱峰有4 个，保留时间分别为25.9、29.7、41.7、45.8 min。
3.HAE清除自由基的能力
3.1 ABTS＋·清除能力
在0～6.0 μg/mL范围内，HAE和两种阳性对照对ABTS＋·的清除率随质量浓度的增加而增大，且呈剂量依赖关系。VC、Trolox和HAE清除ABTS＋·的半抑制浓度（IC50）分别为（1.76±0.21）、（4.32±0.35）μg/mL和（1.72±0.26）μg/mL，表明HAE对ABTS＋·的清除能力与VC相当，优于Trolox。
3.2 DPPH自由基清除能力
在0～7.0 μg/mL范围内，HAE和两种阳性对照对DPPH自由基的清除率随质量浓度的增加而增大，且呈剂量依赖关系。VC、Trolox和HAE清除DPPH自由基的IC50分别为（1.78±0.38）、（3.69±0.52）μg/mL和（0.74±0.24）μg/mL，表明HAE对DPPH自由基的清除能力优于VC和Trolox。
4.HAE对H2O2诱导V79-4细胞氧化损伤的保护作用
正常对照组未受到H2O2诱导氧化损伤和样品处理，细胞存活率为100%。V79-4细胞经不同剂量（50、100、200 μg/mL）的HAE溶液处理后，细胞存活率分别为（98.2±0.8）%、（96.3±1.6）%、（96.0±2.4）%，表明HAE溶液对细胞没有显着性的损伤作用。因此，实验中选用50～200 μg/mL的HAE用于后续抑制H2O2诱导V79-4细胞氧化损伤的实验。
损伤组细胞受到H2O2诱导的氧化损伤，部分细胞生长受阻或凋亡，细胞存活率下降至（51.6±2.1）%。经不同剂量（50、100、200 μg/mL）HAE溶液预处理后，各实验组V79-4细胞存活率分别为（58.7±0.7）%、（68.2±1.2）%、（88.2±1.1）%。同H2O2损伤组相比，经不同剂量HAE样品预处理，V79-4细胞对H2O2诱导的氧化损伤抵抗力逐渐增强，细胞存活率逐渐升高。
5.HAE对H2O2诱导V79-4细胞膜脂质过氧化的影响
正常对照组的TBARS含量为（1.7±0.2）μmol/mg，H2O2损伤组的TBARS含量为（3.8±0.3）μmol/mg，表明H2O2可诱导V79-4细胞膜发生脂质过氧化反应。经不同剂量（50、100、200 μg/mL）HAE溶液处理后，各实验组TBARS含量分别为（2.9±0.7）、（2.5±0.1）μmol/mg和（2.0±0.2）μmol/mg。同H2O2损伤组相比，预先加入50～200 μg/mL HAE可抑制H2O2诱导的细胞膜脂质过氧化，且呈剂量依赖性。
6.HAE对H2O2诱导V79-4细胞内ROS水平的影响
经不同剂量（50、100、200 μg/mL）HAE溶液处理后，实验组V79-4细胞内ROS清除率分别为（40.2±1.7）%、（62.2±2.0）%、（82.4±1.2）%，且清除率随剂量增加呈增高趋势。
结 论
野阳合提取物含有4 种花色苷，结合保留时间和质谱数据等信息，推测分别为矢车菊素-3-半乳糖苷、矢车菊素-3-（6”-香豆酰）葡萄糖苷、芍药色素-3-葡萄糖苷和芍药色素-3-（6”-香豆酰）葡萄糖苷；花色苷提取物对ABTS＋·和DPPH自由基有良好的清除效果，半抑制浓度分别是（1.72±0.26）μg/mL和（0.74±0.24）μg/mL，清除能力优于阳性对照水溶性VE；细胞氧化损伤模型中，50～200 μg/mL的花色苷提取物预处理H2O2诱导V79-4细胞氧化损伤，能明显抑制细胞存活率的下降和脂质过氧化，并降低损伤后胞内活性氧簇水平。因此，野阳合花色苷提取物具有良好的体外自由基清除能力，并对H2O2诱导的V79-4细胞氧化损伤具有保护作用。
