菌种保藏的目的是使菌种长期保存之后,仍然保持着原有的生命力、优良生产性能、形态特征以及不污染杂菌和不发生虫害(虫害在食品行业比较常提到)。
菌种保藏的原理:通过低温、干燥、隔绝空气(真空)和断绝营养等手段,以达到最大限度地降低菌种的代谢强度,抑制菌丝的生长繁殖。保藏过程中,菌种的代谢相对静止,生活活动将处休眠状态,所以能够保藏较长时间。
传统菌种保藏法包括以下几种,并简单列举了其特点及注意事项:
菌种保藏法 | 举例 | 特点 | 注意事项 |
斜面低温保藏 | 试管斜面保藏法 | 优点:简单易行,使用广泛。 | 1.避免多次开启冰箱门,控制相对湿度避免过高或过低,防止发生因冷凝水而发生污染。 |
缺点:贮藏时间短,需经常传代培养。 | 2.贮藏时间依菌种不同而不同。 | ||
液体石蜡保藏 | 液体石蜡保藏 | 优点:操作简单 | 1.石蜡应事先灭菌后使用。 |
缺点:使用前传代由于沾染石蜡,菌种生长慢而弱 | 2.灭菌后应在40℃下放置3天左右后使用,使灭菌进入石蜡的水分得到蒸发。 | ||
悬浮保藏 | 生理盐水保藏法、蒸馏水保藏法、营养液保藏法,甘油管保藏法 | 优点:操作简便 | 1.过程中使用器具应注意灭菌。 |
缺点:广泛性差,仅部分特殊菌种适用该法。(多为真菌) | 2.操作规程中应关注污染 | ||
载体保藏 | 沙土管保藏法,孢子滤纸保藏法,磁珠菌种保藏法 | 优点:应用广泛、效果好 | 1.沙土中金属杂质应去除干净。 |
缺点:部分方法较繁。(滤纸片生物指示剂应用该方法) | 2.应注意干燥除湿 | ||
天然基质保藏 | 麦粒,枝条,木屑 | 优点:专属性强 | 多用于食品、农牧业 |
缺点:方法叫繁。 | |||
真空干燥保藏 | 真空干燥保藏法 | 优点:应有最广泛,效果好。 | 1.冷冻干燥前要将孢子液预冻1h左右,放置抽气初期产生大量泡沫。 |
缺点:设备操作都较为复杂 | 2.关注抽真空时间,防止过程中菌块解冻 | ||
3.熔封安瓿瓶不宜火焰过大。 | |||
液态氮超低温保藏 | 液态氮超低温保藏 | 优点:保藏时间可长达数年至数十年,适用范围广泛(生产企业常用于工作种子的保藏)。 | 1.安瓿瓶应选用适应温度突变的材质。 |
缺点:设备要求较高 | 2.操作过程中注意防止液氮溅出冻伤皮肤。 |