喹诺酮类药物的分析 对试料进行样品前处理。称取试料 1±0.02 g，于 15 mL 具塞离心管中，加乙腈-10% 三氯乙酸溶液（取乙腈 10 mL，用 10% 三氯乙酸水溶液溶解并稀释至 100 mL） 5 mL，漩涡混合 2 min，超声 5 min，于 4 °C 下 5000 rpm 离心 10 min，取上清液 备用。所得样品提取液经 Agilent Bond Elut Plexa 固相萃取柱净化（操作流程见 图 1），复溶后涡旋混匀，于 4 °C 下 12000 rpm 离心 6 min，取上清液供高效液相 色谱测定（液相色谱分析条件见表 1）。
如图 2 所示，本方法比较了 4 μm 和 2.7 μm 薄壳型填料色谱 柱的分析结果：
4 μm 色谱柱半峰宽比 2.7 μm 色谱柱增加了近 30%，灵敏 度有所下降
4 μm 色谱柱的压力较 2.7 μm 色谱柱低 45%，更适合在 400 bar 仪器上使用，2.7 μm 色谱柱适合在 600 bar 仪器上 使用，可根据不同的仪器配置选择不同色谱柱
低柱压和大颗粒填料更耐“脏”样品
本文所采用的薄壳型填料色谱柱相比于传统 5 μm 的全多孔 性填料色谱柱，柱效更高，分析速度更快，在多组分复杂 分析中体现出明显的优势。根据实验结果得到，在喹诺酮 类药物分析中 4 μm 的薄壳型色谱柱相比于 2.7 μm 的薄壳 型色谱柱，在满足分离要求的前提下，具有压力更低、更 加耐用的优势，因此本文选用 4 μm 薄壳型色谱柱进行后续 实验。 通过计算得到，本方法诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、 培氟沙星、洛美沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星、 恶喹酸的定量限为 50 μg/kg，达氟沙星的定量限为 15 μg/kg， 氟甲喹的定量限为 25 μg/kg。 实验在 100-1600 μg/L 浓度范围内测试了各种喹诺酮类药物 的线性，所得结果表明所有化合物在此浓度范围内具有良 好的线性相关性，相关系数 R2 均大于 0.999，如表 2 所示。
如表 3 所示，诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、培氟沙 星、洛美沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星、恶喹 酸在 50-200 μg/kg，达氟沙星在 15-60 μg/kg，氟甲喹在 25-100 μg/kg 的添加浓度水平下，牛奶基质中各药物的 空白样品加标回收率均为 79.28%-99.14%，RSD (%) ≤ 7.42 (n = 6)，表明该方法的准确度和精密度完全能满足喹诺酮类 药物多残留分析的要求。
