在每个区域中取21个复合土样用来推断大陆区域情况。作者使用回归分析来判断样本间的差异情况,而没有使用样本作为分类预测因子,降低分析误差。此外作者计算了每个取样点Chao1值的最小丰度,并作为分析多样性的代表,分析菌群丰度对环境变量的响应,然而最小丰度是以稀有分类群为主。以往的研究者可能并没有筛选出这部分稀有分类群,进而分析结果产生误差。对Chao1值分析后作者对变量进行了多元回归分析,进一步确定了温度因素的重要性。虽然采样是正确的,但是从pH值和降水量对土壤的影响来看也可能会对结果产生一定影响。
以往的实验结果表明,在全球和大陆尺度上土壤的pH值和降水量是对陆生微生物丰度影响的最主要因素。但仍有两项先前研究报道称温度是细菌和真菌丰度最为主要的影响因素。以往研究者可能会忽视引用这部分研究,因而过度强调温度对多样性影响的新颖性。
生态学和微生物实验中的实验重复是实验设计的重要基石,以确保数据能过够正确的分析和解释。正确的实验设计和代表性样本需要很好的结合才能更好揭示真实情况。
应该建议研究者更好的确定实验设计方案,充分的考虑生物地理学方面的技术重复问题。这样才能得到更为准确的实验结果。