本次交流会首先由清华大学林金明教授带来报告,题目是“微流控芯片-质谱联用细胞分析方法研究”。林金明表示,生物细胞存在尺寸小、种类多,内含物和分泌物含量低、成分复杂等特点。此外,细胞还存在生存环境复杂以及随环境变化而变化的特点。
因此,传统细胞内含物或分泌物的分析检测方法存在灵敏度低、选择性低以及高消耗量的缺点。课题组通过对微流控芯片的研发,实现了细胞水平上的精确操控,从分子生物水平上对细胞进行原位实时监控等。微流控芯片可以在几平方厘米的芯片上集成生物、化学等领域的样品制备、生物反应、细胞分离以及细胞培养等操作,因此通过微流控芯片的使用,可以替代传统的技术。
微流控芯片具有以下特点:
1. 芯片材料具有生物相容性。
2. 微米级通道与细胞尺寸相近。
3. 能够提供封闭微环境。
4. 试剂和样品消耗量小。
5. 分析速度快。
6. 容易实现集成化、自动化。
课题组通过建立微流控芯片-质谱联用细胞分析方法解决了质谱与微流控芯片的联用问题,成功建立了细胞通讯模型,实现金雀异黄酮抗癌作用代谢物分析以及血管皮细胞提高胶质瘤干细胞Bmi-1基因增强对于替莫唑胺耐药性的分析等。
林金明教授表示,为解决微流控芯片-质谱联用的困难,课题组与岛津公司联合设计了新型专利仪器,同时为仪器设计了使用六通道的微流控芯片。通过这些设计,细胞微流控芯片质谱联用分析仪在未来的细胞药物代谢研究、药物筛选、纳米材料毒性研究等方面有很大潜力。
由岛津企业管理(中国)有限公司分析测试仪器市场部尹宏瑞带来报告,题目是“纳米导向限制性酶联合微流量LC/MS平台对单克隆抗体的高灵敏度检测”。报告中选用曲妥珠单克隆抗体为研究对象,使用nSMOL前处理方法以及Nexera Mikros分析平台,对单克隆抗体的检测灵敏度进行了分析、优化。
报告中介绍,实验人员首先通过选择性酶解技术获得靶抗体药物蛋白序列,之后使用nSMOL前处理方法获得选择性多肽段,其优势在于通过物理空间的尺寸差异进行选择,避免传统酶解方法带来的复杂多肽段的问题。
最后通过Micro LC-MS(Nexera Mikros平台)在高灵敏度下进行多肽分析,相比常规LC-MS,灵敏度提升十倍。经过多个实际检测分析,纳米导向限制性酶联合微流量LC/MS平台具有方法线性范围宽,灵敏度高以及数据重现性好的特点。