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鸡卵类黏蛋白过敏原性的在体与离体实验

放大字体  缩小字体 发布日期:2018-05-24
核心提示:鸡蛋具有丰富的营养价值,是最物美价廉的食物之一,也是婴幼儿早期主要的膳食蛋白来源,还是许多加工食品的主要组成成分。卵类黏蛋白是鸡蛋过敏反应中致敏性最强、最普遍的蛋白质,而研究卵类黏蛋白在体致敏性的动物模型鲜见明确报道。
   鸡蛋具有丰富的营养价值,是最物美价廉的食物之一,也是婴幼儿早期主要的膳食蛋白来源,还是许多加工食品的主要组成成分。卵类黏蛋白是鸡蛋过敏反应中致敏性最强、最普遍的蛋白质,而研究卵类黏蛋白在体致敏性的动物模型鲜见明确报道。
 
  来自天津商业大学生物技术与食品科学学院的王丽娟、吴子健和刘露等人选择豚鼠为研究对象,以卵白蛋白为阳性对照,以磷酸盐缓冲液(PBS)为阴性对照,通过比较卵类黏蛋白与卵白蛋白的全身过敏反应和对致敏豚鼠离体肠平滑肌收缩反应(Schultz-Dale反应)的影响,建立卵类黏蛋白过敏实验的整体实验和离体器官实验的动物模型,为深入研究卵类黏蛋白过敏及进一步开发与评价低敏或无致敏性蛋类食品中过敏原的消减效果提供参考。
 
  1
 
  卵类黏蛋白的过敏性休克反应
 
  PBS溶液(阴性对照)组的过敏率为0,1 mg/mL卵白蛋白(阳性对照)组豚鼠100%出现了过敏反应,并因过敏性休克而死亡,表现过敏反应极强阳性,评分达4 分。1~4 mg/mL卵类黏蛋白各组豚鼠也出现明显的过敏反应,其反应强度呈现一定的量效关系,即随致敏和激发剂量增加,过敏反应程度加强。4 mg/mL卵类黏蛋白与1 mg/mL卵白蛋白的致敏性相近(P>0.05)。
 
  2
 
  Schultz-Dale反应
 
  PBS组在攻击后无明显反应(且存在run-down现象),1 mg/mL卵白蛋白组攻击后的肠平滑肌收缩幅度较攻击前明显加大(P<0.01);1~4 mg/mL卵类黏蛋白各组受攻击后的肠平滑肌收缩力较攻击前也明显加强(P<0.01),与1 mg/mL卵白蛋白组的反应相近(P>0.05),表明卵类黏蛋白具有强致敏性。不同质量浓度卵类黏蛋白组间比较,2 mg/mL卵类黏蛋白对致敏肠平滑肌的攻击作用强于1 mg/mL卵类黏蛋白组,而4 mg/mL卵类黏蛋白的攻击作用有所减弱,这可能是随卵类黏蛋白过敏原致敏剂量加大,致敏性增强,使其在致敏强化期间就有部分过敏活性物质释放,引起肠平滑肌的基础张力增高,致使在过敏原攻击后的收缩力增强幅度减小。
 
  3
 
  卵类黏蛋白致敏豚鼠血清抗体效价
 
  用20 μg/mL包被抗原包被酶标板,加入不同稀释度的各待测血清,酶标仪测定OD492 nm,计算抗体效价,结果致敏剂量为1、2 mg/mL和4 mg/mL的卵类黏蛋白各组豚鼠,其血清IgG效价分别为64、96和192,其致敏豚鼠血清的抗体效价水平与其过敏的临床表现趋势相一致,具有剂量依赖关系。
 
  4
 
  卵类黏蛋白致敏类型的初步分析
 
  攻击前、后肠平滑肌收缩力差异不显着(P>0.05),2 mg/mL卵类黏蛋白与4 mg/mL卵类黏蛋白组差异也不显着(P>0.05)。提示组胺的释放在卵类黏蛋白致敏过程中起重要作用,卵类黏蛋白引起的过敏反应极大可能是由IgE介导的Ⅰ型变态反应。
 
  结 论
 
  1)在实验观察剂量下,1 mg/mL卵清白蛋白组豚鼠100%出现过敏性休克并死亡,全身性过敏反应呈极强阳性(4 分);卵类黏蛋白组豚鼠的反应与卵白蛋白组相似(P>0.05),大部分动物出现死亡,全身性过敏反应100%呈阳性(2.04~3.68 分);不同剂量的卵类黏蛋白引起的豚鼠全身过敏反应呈现出剂量依赖性,当致敏剂量为4 mg/mL时,全身性过敏反应评分为3.68。2)卵类黏蛋白对Schultz-Dale反应的影响也与卵清白蛋白相似,使致敏的肠平滑肌收缩活动明显加强;以2 mg/mL致敏时,豚鼠离体肠收缩力改变率最高,为538.5%。3)不同致敏剂量卵类黏蛋白组豚鼠血清免疫球蛋白(Ig)G水平较对照组明显升高,且呈剂量依赖性。由此建立的卵类黏蛋白在体与离体过敏实验的动物模型可用以检测卵类黏蛋白过敏原及评价其过敏原的消减效果。
 
 
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