来自河南科技大学食品与生物工程学院的罗磊、王雅琪和马丽苹等人在对绿豆皮SDF体外清除自由基能力研究的同时,采用皮下注射D-半乳糖的方法诱导小鼠衰老模型来研究绿豆皮SDF在体内的抗氧化作用,为绿豆皮SDF开发利用提供科学依据和理论依据。
1 体外抗氧化作用
还原力测定结果
VC的还原力在质量浓度为250 μg/mL时已达到了2.063,之后无明显变化。而绿豆皮SDF的还原力在0.062 5~4.000 0 mg/mL范围内随着质量浓度的增加而增大,当质量浓度为4 mg/mL时,还原力为1.526。在所考察的质量浓度范围内,绿豆皮SDF的还原力不如VC。
DPPH自由基清除效果
VC对DPPH自由基的清除率在250 μg/mL时为99.32%,随着质量浓度的增大其清除率逐渐趋于100%。绿豆皮SDF对DPPH自由基的清除能力呈现出剂量依赖性。当质量浓度为62.5 μg/mL和4 mg/mL时,其清除率分别为21.81%和82.65%。
·OH清除效果
在质量浓度为0.062 5~4.000 0 mg/mL范围内其清除率与质量浓度有明显的量效关系。随着SDF质量浓度的增大,绿豆皮SDF的·OH清除率也逐渐增大,从62.5 μg/mL时的17.45%到4 mg/mL时的85.16%,而VC的·OH清除率在500 μg/mL时已几乎达到了100%。
2 绿豆皮SDF对小鼠的抗氧化作用
绿豆皮SDF对小鼠血清和肝组织中T-AOC水平的影响
模型组小鼠肝组织和血清T-AOC水平均极显着低于正常对照组(P<0.01),血清中SDF低、中剂量组也极显着低于正常组,肝组织中只有SDF低剂量组极显着低于正常组;与模型组相比,除SDF低剂量组小鼠血清T-AOC水平低于其模型组外,其余小鼠肝组织和血清中各剂量组T-AOC水平均极显着高于模型组,说明中、高剂量的SDF能有效提高小鼠体内T-AOC水平。
绿豆皮SDF对小鼠血清和肝组织中T-SOD活力的影响
模型组小鼠肝组织和血清T-SOD活力均极显着低于正常对照组(P<0.01);与模型组相比,小鼠SDF低、中剂量组肝组织中T-SOD活力降低,但差异不显着(P>0.05),其余小鼠血清、肝组织中SDF各剂量组T-SOD活力均提高,其中小鼠SDF各剂量组血清中T-SOD活力与模型组差异极显着(P<0.01),小鼠SDF高剂量组肝组织中T-SOD活力与模型组差异显着(P<0.05)。
绿豆皮SDF对小鼠血清和肝组织中CAT活力的影响
模型组和SDF低剂量组小鼠肝组织和血清CAT活力均极显着低于正常对照组(P<0.01);小鼠SDF各剂量组与模型组相比CAT活力均有一定的升高,除小鼠血清SDF高剂量组具显着性(P<0.05)外,其他各组小鼠SDF各剂量组与模型组无显着差异(P>0.05)。
绿豆皮SDF对小鼠血清和肝组织中MDA含量的影响
与正常对照组相比,模型组小鼠肝组织和血清MDA含量均极显着增加(P<0.01),SDF低、中剂量组小鼠肝组织中MDA含量升高且有极显着、显着差异;SDF各剂量组小鼠血清MDA含量较模型组均极显着或显着减少。
绿豆皮SDF对小鼠肝组织中GSH-Px活力的影响
与正常对照组相比,模型组小鼠肝组织中GSH-Px活力均有所降低,但都不具显着性差异(P>0.05),小鼠SDF高剂量组GSH-Px活力较模型组差异显着(P<0.05)。
模型分析与讨论
本研究通过D-半乳糖皮下注射(200 mg/kg)构建衰老动物模型来评估绿豆皮SDF粗提物的抗氧化活性。结果显示与正常对照组相比,模型组小鼠血清和肝组织中总蛋白含量、T-AOC水平以及T-SOD、CAT、GSH-Px活力均有所降低,MDA含量大幅升高,且大部分差异显着或极显着,因此说明本研究衰老动物模型构建基本成功。
结 论
当质量浓度为4 mg/mL时,绿豆皮可溶性膳食纤维的还原力为1.526,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和羟自由基的清除率分别为82.65%和85.16%。动物实验结果显示,与正常对照组相比,D-半乳糖衰老模型组小鼠血清和肝组织中总抗氧化能力以及过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力均有所降低,丙二醛含量升高,且大部分差异显着(P<0.05,P<0.01),说明小鼠D-半乳糖衰老模型构建成功。与模型组相比,绿豆皮可溶性膳食纤维各剂量组小鼠血清和肝组织中丙二醛含量大幅降低,高剂量绿豆皮可溶性膳食纤维可显着提高小鼠血清和肝组织总抗氧化能力以及过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05)。因此,绿豆皮可溶性膳食纤维具有良好的抗氧化作用。