【中国仪器网 行业应用】胆固醇是动物性食物中常见的成分,而人类过多食用胆固醇则会引发动脉粥样硬化、高血压、冠心病等一系列心血管疾病以及风湿性关节炎、癌症、糖尿病和帕金森等相关疾病。据文献报道,食用植物油中一般不含或含有极少量的胆固醇,而通常动植物组织中都含有甾醇,动物油脂的特征性甾醇是胆固醇。因此,可以通过检测食用植物油中的胆固醇含量来判定植物油中是否含有动物油脂,从而推断该植物油是否混有地沟油。
目前,有关食品中胆固醇的测定方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、薄层色谱法、分光光度法等。这些方法足以解决胆固醇的分离和检测,但样品基体复杂和目标物含量低使得样品前处理成为决定分析结果好坏的关键环节。目前常用的胆固醇样品提取净化方法主要是皂化法。而采用凝胶渗透色谱(GPC)进行样品前处理的报道还很鲜见。采用合适孔径的惰性多孔材料做固定相,GPC就可以基于分子的空间排阻效应大小将不同体积的物质分离。食用油中的油脂等高分子化合物在GPC柱上保留很弱,较快流出色谱柱,而小分子有机物则被保留在柱上,从而达到除去样品中大分子基体物质的目的。凝胶渗透色谱技术以其突出的优点,越来越广泛地应用于含生物大分子的各类样品的前处理。采用全自动凝胶色谱仪,以胆固醇为检测目标,对样品进行分离净化,采用HPLC进行测定,可以简便、快捷、实用地测定食用油中胆固醇。
气相色谱-氢火焰离子化检测器也可以定量测定食用油中胆固醇含量。具体方法就是先对样品进行强碱皂化,再用衍生试剂进行衍生净化,然后用正己烷做为提取液,加水除杂,最后利用气相色谱仪的毛细管色谱柱和氢火焰离子化检测器对提取液进行分离和检测。利用该方法,胆固醇与杂质可以得到良好分离。该方法操作简便,灵敏度高,重现性和选择性好,分离效果良好,最低检出量和回收率均符合微量分析的要求,是检测食用油中胆固醇的快速有效的定性、定量方法。
还有一种方法是薄层层析技术,它也可以快速测定胆固醇含量以鉴定地沟油。主要是采用简便易行的硅胶薄层层析技术对油品中的胆固醇进行测定。油品经直接皂化法处理后,胆固醇作为不皂化物分离提取出来,再采用硅胶薄层层析方法检测胆固醇含量。