来自北京工商大学食品营养与人类健康北京高精尖创新中心的赵磊、王鑫和姜飞等人将南瓜、山药、葛根和桑叶提取物制备成复方,通过测定比较各组小鼠体质量及饮食饮水量、空腹血糖浓度、肝糖原含量、血清中血糖浓度、糖化血清蛋白(GSP)浓度、糖化血红蛋白(GHb)相对含量和抗氧化指标,探讨植物提取物复方对四氧嘧啶型糖尿病小鼠的降血糖作用,同时对植物提取物复方中的主要功效成分含量进行测定,以期为植物提取物复方降血糖功能性食品的开发提供一定的理论依据。
植物提取物复方中有效成分的含量
由定量分析可知,植物提取物复方中含有丰富的多糖和黄酮类成分,其中南瓜多糖、山药多糖、葛根总黄酮、葛根素和桑叶总黄酮的含量分别为(0.93±0.04)、(1.01±0.06)、(1.29±0.07)、(0.28±0.01)g/100 g和(0.51±0.03)g/100 g(以原料干质量计)。
植物提取物复方对糖尿病小鼠体质量的影响
正常对照组小鼠体质量随着灌胃时间延长一直呈增加趋势,第4周时正常对照组小鼠体质量较实验初期增加51.4%(P<0.01);其余4 组小鼠在第2周达到体质量最大值,之后随着糖尿病症状的加剧,小鼠体质量开始大幅度下降。4 周实验结束时,模型组小鼠体质量极显着低于正常对照组,仅为正常对照组的67.8%(P<0.01)。阳性组和植物提取物复方低、高剂量组均能不同程度缓解糖尿病小鼠体质量的降低,其中植物提取物复方高剂量组效果最为显着,第4周时体质量为正常对照组的83.0%(P<0.05)。结果表明,植物提取物复方能够有效缓解糖尿病小鼠消瘦症状。
植物提取物复方对糖尿病小鼠饮食饮水量的影响
从治疗初期到实验结束,各组小鼠饮食量整体呈上升趋势,正常对照组、植物提取物复方组小鼠饮食量增长缓慢,模型组、阳性组小鼠饮食量迅速上升。从第4周饮水量分析看,模型组小鼠饮水量是正常对照组的3.65 倍,阳性组、植物提取物复方低剂量组和高剂量组饮水量较模型组分别减少8.6%、22.2%(P<0.05)和28.4%(P<0.01)。从小鼠饮水饮食量分析知,相比于模型组,植物提取物复方可以显着降低糖尿病小鼠的饮水饮食量(P<0.05),缓解小鼠糖尿病症状。
植物提取物复方对糖尿病小鼠空腹血糖浓度的影响
正常对照组起始血糖浓度平均值为6.7 mmol/L,其余4 组小鼠在四氧嘧啶造模结束后,小鼠血糖浓度平均值为22.1 mmol/L。与正常对照组比较,模型组血糖浓度总体呈逐渐升高趋势。与模型组比较,阳性组、植物提取物复方低剂量组和高剂量组血糖浓度总体呈逐渐降低趋势。4 周实验结束时,正常对照组小鼠血糖浓度维持在(6.9±0.2)mmol/L;模型组小鼠血糖浓度达到最高,为24.8 mmol/L,较实验初期增加12.2%。阳性组和植物提取物复方高剂量组小鼠血糖降低效果最显着,分别较实验初期降低23.2%(P<0.01)和18.4%(P<0.05)。结果表明,四氧嘧啶模型糖尿病小鼠在不接受治疗情况下糖尿病症状加剧,血糖浓度持续升高。
植物提取物复方对糖尿病小鼠胰岛素耐量的影响
小鼠注射胰岛素后,0~60 min内,各组小鼠血糖浓度持续降低,60 min达到最低值。随后60~120 min,各组小鼠血糖浓度升高,分析120 min与0 min血糖浓度的比值,正常对照组、模型组、阳性组、植物提取物复方低、高剂量组分别为79.0%、88.8%、85.3%、83.7%、75.1%。结果表明,模型组小鼠对胰岛素的敏感性大大降低,其血糖降到最低值后升高速率快,表现为对胰岛素抗性较高。阿卡波糖和低剂量植物提取物复方不能显着提高小鼠胰岛素敏感性,其血糖恢复速率与模型组无显着差异(P>0.05)。高剂量植物提取物复方可显着增强小鼠对胰岛素的敏感性(P<0.05)。
植物提取物复方对糖尿病小鼠肝糖原含量的影响
模型组小鼠肝糖原含量极显着低于正常对照组小鼠,较正常对照组减少53.7%(P<0.01)。阳性组和植物提取物复方低剂量组肝糖原含量与模型组相比无显着性差异(P>0.05),植物提取物复方高剂量组肝糖原含量较模型组增加32.5%(P<0.05)。结果表明,四氧嘧啶诱导小鼠糖尿病后,小鼠肝脏肝糖原合成能力严重受损,植物提取物复方高剂量可以显着改善小鼠肝糖原合成能力,但仍未恢复到正常水平,短期内无法达到治愈的程度。
植物提取物复方对糖尿病小鼠GSP浓度的影响
各组小鼠血清GSP浓度,正常对照组小鼠GSP浓度为1.30 mmol/L,模型组小鼠GSP浓度为1.87 mmol/L,较正常对照组显着升高了43.8%(P<0.01),这表明模型组小鼠近两周内血糖浓度很高,小鼠糖尿病症状严重。阳性组小鼠GSP浓度为1.58 mmol/L,较模型组降低15.5%(P<0.05),阿卡波糖短期内控制糖尿病小鼠血糖有一定的辅助作用。植物提取物复方低剂量组GSP浓度与模型组相比无显着性差异(P>0.05);植物提取物复方高剂量组GSP浓度较模型组显着降低了17.6%(P<0.05)。
植物提取物复方对糖尿病小鼠GHb相对含量的影响
模型组小鼠在实验期内,GHb相对含量是正常对照组的2.67 倍,模型组小鼠糖尿病症状严重,血糖浓度居高不下,小鼠糖代谢严重受损,血清中高含量的GHb改变红细胞对氧的亲和力,使组织与细胞缺氧,容易引起小鼠心脑血管疾病等并发性症状。阳性组小鼠血清中GHb相对含量相比于模型组显着降低了30.9%(P<0.01),表明阿卡波糖在近一个月的实验期内可以有效地通过控制小鼠GHb相对含量降低小鼠血糖浓度,起到了一定的治疗作用。植物提取物复方低、高剂量组小鼠GHb相对含量比模型组分别降低了12.2%(P<0.05)和37.8%(P<0.01)。结果表明,植物提取物复方对四氧嘧啶诱导的不可逆小鼠糖尿病有一定的辅助治疗作用,可以使糖尿病小鼠症状减轻,血糖浓度和GHb相对含量降低,且高剂量效果优于低剂量。
植物提取物复方对糖尿病小鼠肝脏氧化应激指标的影响
给药4 周后,各组小鼠肝脏中抗氧化指标与正常对照组相比,模型组小鼠T-AOC和SOD活力大幅度降低,分别较正常对照组降低38.7%(P<0.01)和27.1%(P<0.01)。模型组小鼠MDA含量极显着升高(P<0.01),较正常对照组增加78.1%。结果表明,模型组小鼠抗氧化能力受损,机体清除自由基和坏死细胞能力减弱,产生的有害成分增多。与模型组相比,阳性组小鼠T-AOC、SOD活力和MDA含量无显着性差异;植物提取物复方能够使模型组小鼠机体的T-AOC和SOD活力升高,MDA含量降低,明显改善小鼠的氧化应激状态,其中植物提取物复方高剂量组优于低剂量组。植物提取物复方高剂量组T-AOC、SOD含量分别较模型组显着增加50.2%(P<0.05)、35.2%(P<0.01),MDA含量降低了20.6%(P<0.01)。因此,植物提取物复方有助于糖尿病小鼠清除体内自由基和坏死细胞,增强机体免疫系统。
结 论
植物提取物复方中的主要有效成分为南瓜多糖、山药多糖和葛根素,含量分别为(0.93±0.04)、(1.01±0.06)、(0.28±0.01)g/100 g(以原料干质量计)。干预4 周后,与模型组相比,植物提取物复方组小鼠体质量、肝糖原含量显着增加,饮食饮水量、空腹血糖浓度、GSP浓度和GHb相对含量明显降低,胰岛素敏感性增强,且高剂量效果优于低剂量。植物提取物复方组较模型组总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活力明显升高,丙二醛含量显着降低,表现出改善小鼠氧化应激的作用。
结论:南瓜、山药、葛根和桑叶提取物复方能够显着降低四氧嘧啶性糖尿病模型小鼠血糖浓度,有效改善氧化应激状态。