(1)非单色光的影响: 紫外一可见分光光度讣使用连续光源和分光器分光,不可能得到真正理想的单色光;为保证在测量中能得到充分的光强,仪器必须保持一定的狭缝宽度。由狭缝射出后投射到被测物质上的光,是一个有限宽度的谱带——光谱通带。随光谱通带宽度的增大,吸收光谱的分辨率降低,并偏离朗伯一比尔定律。
(2)非吸收光的影响:当来自出射狭缝的光的光谱通带宽度大于吸收光谱谱带时,投射在被测物质上的光就含有非吸收光。这不仅能使灵敏度降低,且能使校准曲线向横坐标轴弯曲而偏离朗伯一比尔定律。
(3)非平行光的影向:当入射光与比色皿的光学面不垂直时,通过被测物质的实际光程就大于比色皿的厚度。这种情况所造成的影响很小,一般可忽略不计。
(4)散射的影响:当被测物质不均匀,其巾含有微小颗粒物,如悬浮物或胶态粒子等散射质点时,入射光通过该物质就会使部分光被散射而损失,从而减小了透射光的性度,增大了实际吸光度,导敛偏离朗伯一比尔定律。
(5)荧光的影响:某些物质吸收光后能再新辐射出波长和入射光波长相近的荧光而导致朗们一比尔定律失效。化学反应的影响 在被测溶液中待测组分发发生解离、缔合、光化等作用,或与溶剂相互作都将使待测组分的吸收曲线发生明显的改变,如吸收峰的形状、位置、强度以及精密结构都会发生变化,从而导致偏离朗伯一比尔定律。
(6)溶剂的影响:溶剂对吸收光潜的影响颇为最要。辅射能引起某化合物的分解而导致偏离朗们比尔定律。