答：从符合计数范围的稀释度三个平行样中任选五个做血浆凝固酶试验。
2、微生物回收采用涂布法时，试验组1mL含菌量不大于100CFU。涂布时取供试液0.2mL，含菌量会不会太少，不利于计数？
答：涂布法回收准备工作是取隔夜培养物0.2mL，进行梯度稀释，大概稀释到10的6次方可以达到100CFU/mL，然后分别取0.3,0.3,0.4mL进行涂布，也可以前后两个梯度均进行334涂布。
3、哪些奶粉需要检测阪崎肠杆菌，依据的标准是什么？
答：一段婴幼儿奶粉都需要，企业为保证其质量，因此会制定内部质量控制标准或规定对其相关原辅料，包装材料以及直接接触面等进行检测，当然包括奶粉量勺等。具体依照GB 10765-2010。
4、在进行煮沸灭菌培养基配制过程中如何避免液体喷洒出来被烫伤的情况，有什么好的灭菌方法，又可以有效防护？
答：选择口径大的三角烧瓶，培养基以不超过三角烧瓶容积的1/3为宜，电炉上加盖石棉网，带上高温手套，专人看守防止爆沸。
5、霉菌检测中PDA和孟加拉红培养基，效果一样吗？有没有哪种更适合哪一类？
答：PDA中氯霉素可以抑制细菌生长，孟加拉红不仅含有氯霉素抑制细菌生长，并且抑制繁殖较快的霉菌菌落的大小和高度，还作为着色剂，便于菌落观察。
6、食品微生物检验大肠菌群和沙门氏菌要求调节pH，可以调整样品原液吗？如果调样品原液会对结果有影响吗？有些做原液，如果调整样品匀液，原液也得调整吗？
答：需要调节pH的样品种类不多，大部分食品pH在6-8之间。pH调节液体从原液开始调整；固体从十倍稀释度调节。除了个别样品（食醋等）调节pH需要较多试剂，其他样品仅需微量，对微生物检测来说影响很小。
7、大肠菌群产气证实是十倍3，百倍3，千倍1，万倍1，选MPN是331还是311？
答：标准为GB 4789.3，稀释度选择选311。
8、同一个样品，菌落总数约50，但霉菌酵母计数高达800，这样的数据可靠吗？
答：菌落总数是指一群在平板计数琼脂上生长发育的嗜中温需养或兼性厌氧菌的菌落总数，那就可能包括在此条件下生长的霉菌和酵母，当然还是细菌占绝大多数，你检出的菌落总数比霉菌和酵母少的多也是可能的。可能你的样品中霉菌和酵母确实很多，而平板计数琼脂上的pH值、营养成分及培养温度并不适合你样品中的那些霉菌和酵母的生长，另外，培养条件也有一定的关系。
9、培养基适用性检查是每次配制做还是换批号和厂家再做？
答：GB 4789.28 是国标对培养基的性能测试要求，验证每批购买要做，每批购买的培养基有不同批号则每个批号都要做，下次购买如果和本次购买批号等同依然要做，每批次做一次即可，若换厂家，必须要做。
10、标准要求样品控制单增李斯特菌，是否可以应用李斯特菌快检卡进行检测，有什么优势？
答：本情况需根据实际情况对待，如果此产品其产品标准致病菌检测规定了检测单增李斯特，那么根据其产品标准引用的检测标准来选择检测方式方法，一般为国标，国标没有允许快检！如果是内部质量控制，则允许使用快速检测方法，以减少工作量。
11、微生物实验过程中使用的移液枪怎么灭菌？
答：移液枪用纱布包好，外面报纸包好灭菌。不能湿热灭菌的枪，在枪口处塞入少许棉花，外面采用表面灭菌的方法擦拭灭菌，里面采用热空气交换法或者洁净空气交换法处理。
12、微生物实验过程中如果移液枪枪头想要重复使用怎么办？
答：先将移液枪头充分清洗干净后烘干，然后用枪头盒装好，报纸包好灭菌。枪头少的话放入平皿或者小烧杯后，报纸包好灭菌。
13、微生物实验回收率上下限是多少？
答：50—200%（药典规定）。
14、灭菌后的物品怎么保存，几天内可以继续使用?
答：移液管、平皿之类的工器具没打开放无菌室一般可以放置两个星期左右。灭菌后的培养基放冰箱冷藏保存通常可放一星期。
15、 新国标GB4789.10-2016金黄色葡萄球菌检验中培养时间很多都改成了24-48h ，这个跨度有点大，具体怎么判定啊？
答：如果培养24h后已经长菌就不需要再进行培养了；如果培养24h后未长菌则需要继续培养至48h。
16、新标准 GB 4789.15-2016 霉菌和酵母计数， 有一条新的变化：“”菌落数在10以内时，采用一位有效数字报告；菌落数在10-100之间，采用两位有效数字报告”， 有这样一种情况： 样品按照1:10稀释后，最低稀释倍数10倍的结果，如果分别为：1， 0， 算平均数并乘以相应稀释倍数后，结果为： 5， 这个时候，结果报 ：5 CFU/g(ml)吗？ 以前我们是报<10。就是如果样品稀释了10倍，检测结果是5，这个时候报" 5" 还是"<10 "? 这条规则其他标准没提，只适用于 霉菌酵母？ 其他项目 菌落总数，大肠菌群等，是否适用？？？
答：6.1.5若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。也就是说以小于1乘以稀释倍数形式报告时，是指均无菌落生长时，你的平板既然有长菌落，结果就应该是5，“菌落数在10以内时，采用一位有效数字报告；菌落数在10-100之间，采用两位有效数字报告”这个主要是为了防止出现8.5这样的结果，按10版100以内采用两位有效数字报告，那8.5是符合要求的，存在歧义，16版更严谨了些。
17、请教食品车间人员手部微生物检测的具体方法?
答：1)被检人员双手五指并拢，用浸湿生理盐水的脱脂棉在手指曲面，从指尖、指沟处到指端来回涂抹2次（一只手涂抹面积约30平方厘米）。
2)将脱脂棉放到10mL灭菌生理盐水采样管内，盖紧试管，详细标记取样点和取样时间。
3)将取好的样品送到检测，由检测员将每只样试管振打80次或用混匀器充分混匀，取1mL样液，放入灭菌平皿内，倾注营养琼脂，每个样品平行接种两块平皿，同时接种一个空白样，在平皿上详细标记取样点和取样时间。
4)将采样后的平皿在35-37℃条件下培养48±2小时后取出查看结果，计数平板上的细菌菌落数；（将采样后的平皿在27-29℃条件下培养5-7天后取出查看结果，计数平板上的霉菌菌落数）。
具体可参照标准 GB 15979- 2002。
18、 培养皿上用记号笔写的字，用酒精擦完还有残留的颜色咋办？
?答：有二个办法：一，棉球做成小球球（和医生擦的那种大小）然后泡酒精里，用时候少量多次。这样残痕少。第二个办法：买点去污粉，先统一找块抹布蘸去污粉把字先擦拭掉，然后再去统一擦拭去污粉，然后清水洗净。
19、微生物一般默认是不用做回收率，感觉是约定俗成的了，但是为什么呢？有时候会有做化学的朋友问我，但是又没有一个特别好的解释。大家有没有很权威的或者理论支持很强的理由呢？
答：应该是因为微生物分布的不均匀性吧，另外微生物会生长繁殖，也是重要的影响因素啊；食品行业没有强制要求而已；制药行业微生物检验方法验证是要求做回收率的，详见《中国药典》2015年版四部通则与《中国药品检验标准操作规范》2010年版中“微生物限度检查”有关内容。
20、内审时，专家提出高压灭菌器的灭菌时间没有校准，可是，当地的省计量院计量高压灭菌器时依据的标准只需要对温度和压力进行校准，没有时间项目，这个该如何整改？
答：这里提供一个可行性方案：增加秒表，操作员进行秒表与灭菌器进行校准书写记录，每年对秒表进行校准。
21、一般在超净工作台里开紫外灯，然后把玻璃门关下。如果不能穿透玻璃，是不是在超净工作台外还要在开一个紫外灯灭菌啊？
答：紫外线是不能穿透玻璃的，因为紫外线波长短，能量不高，穿透能力比较弱，只能做表面的杀菌，且作用有效距离只有1.5米；紫外线是不能穿透玻璃的，超净工作台外还要在开一个紫外灯灭菌。
