来自中国检验检疫科学研究院的何彦平、金涌和天津大学精密仪器与光电子工程学院的陈达等人对人工模拟抗体以及基于人工模拟抗体酶联检测技术在食品安全检测中的应用展开论述。
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基于适配体的酶联检测技术在食品安全检测中的应用
适配体的优点是靶分子范围广、筛选周期短等;但RNA适配体易被酶降解,多数适配体亲和力略差于传统抗体。
在食品安全检测中,由于适配体易于筛选和制备,基于适配体的酶联检测技术有着广泛的应用。目前基于适配体酶联检测技术包括直接竞争法、间接竞争法和夹心法。夹心法创造性地将一个适配体剪成2 段应用到分析技术中,可有效提高检测的灵敏度和特异性,是基于适配体酶联检测技术的一个重要发展方向。
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基于重组受体的酶联检测技术在食品安全检测中的应用
重组受体可通过基因工程的方法在细胞中大量表达,利用受体可特异结合信号物质(配体)的特性,可将纯化的重组受体作为检测元件应用到分析技术中。
在食品安全检测中,基于受体的酶联检测技术因能实现多残留检测从而应用日益广泛。基于受体酶联检测技术检测目标物数量最高可达27 种,可以有效地提高检测效率,降低检测成本,最大限度满足食品安全检测中多残留检测的要求。由于重组受体的特异性弱,该技术无法区分有交叉反应的目标物,不适合食品安全中特定目标物的检测。
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基于MIP酶联检测技术在食品安全检测中的应用
MIP与传统抗体相比,对制备技术要求不高,并且具有良好的耐酸、碱、高温等性质,合成成本低,保存时间长等优点;但MIP的亲和力和特异性要略差于传统抗体。
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在食品安全检测中,因MIP成本低且制备简便,基于MIP的酶联检测技术具有广泛应用
基于MIP酶联检测技术能达到较低的检测限和较高的回收率;其最大的优势是可以直接在96 孔板中合成,合成过程简单、周期短、成本低。由于MIP的目标物是小分子,该技术对食品安全中的大分子有毒有害物质无法检测。
近年来,人工模拟抗体多肽由于结构简单、易实现非竞争法检测小分子物质,在检测领域有了长足的发展。人工模拟抗体多肽易于化学合成、成本低廉;但其亲和力略差于传统抗体。在食品安全检测中,因多肽筛选与鉴定效率高并可以建立非竞争的检测模式,基于多肽酶联检测技术包括噬菌体抗免疫复合物分析法(PHAIA)受到越来越多的重视。基于多肽酶联分析方法可以建立非竞争方法检测食品中有毒有害的物质,提高了方法的灵敏度和阳性检出率。作为新型检测元件,多肽在食品安全检测中的应用将是一个重要方向。
结 论
广义人工模拟抗体包括适配体、重组受体、分子印迹聚合物及多肽。人工模拟抗体与传统抗体相比优势显着,其具有易实现工业化生产、成本低、保存方便、可反复使用等特点。酶联检测技术是人工模拟抗体在食品安全检测中应用最为广泛的技术。
人工模拟抗体非来源于传统抗体,模仿传统抗体作为分子识别元件应用于分析检测。由于食品安全检测中目标物(大多是半抗原小分子物质)的传统抗体较难获得,人工模拟抗体将替代传统抗体在分析检测中发挥更大的作用。在未来的食品安全检测中,人工模拟抗体将会在以下两方面得到更进一步的发展。