目前,我国相关法规、规范要求进行的毒理学安全性评价工作和功能学评价在许多方面主要通过动物实验,因此,动物的质量直接关系到实验数据的精确性,而动物质量的好坏又和动物的来源及实验饲养动物的设施与管理有着直接的联系。根据《中华人民共和国实验动物管理条例》和《广东省实验动物管理办法》,2001年,广东省疾病预防控制中心新建了SPF级动物房,2002年经广东省实验动物监测所验收合格,取得了《实验动物使用许可证》,正式投入使用。
目前,SPF级动物房主要协助进行功能食品、普通食品、化学品和消毒杀虫产品的毒理学和功能学检测。SPF级动物房的建立和使用,进一步提高了实验数据的准确性和稳定性,减少了实验误差,同时也带来了可观的经济效益。现将SPF级动物房的情况介绍如下。
1 概况
1.1 建筑特点
新建的SPF级动物房是在原有的普通实验室的基础上改建而成,改建后的动物房,建筑面积600m2,室内净高2.2m,墙壁和天花板采用彩钢夹心板,地面采用环氧树脂。
采用双走廊(洁净走廊和次洁净走廊)设计,屏障系统内共有大鼠实验室8间,小鼠实验室4间,功能实验室2间,检疫室、观察室和消毒物品储存室各1间(见图1)。此外,屏障系统外配有监控室、洗消间、解剖室、洗涤室。
1.2 空调通风系统
采用全新风空调通风系统。空气经过初效、中效和高效三级过滤,空调设备位于初效和中效过滤之间,由两套单元式机组组成,每套机组有两台压缩机。进风口位于天花板中央,每间室设四个长方形排风口,离地013m。两套空调机组相互独立,当一台机组检修时,另一台机组可顶替使用,从而保证整个系统的正常运行。
1.3 设计参数[1]
温度:18～29℃;相对湿度:50%～80%;换气次数:10～20次/h;气流速度:≤0118m/s;静压差>20Pa;空气洁净度:相当于一万级;落下菌数<2145个/皿;氨浓度<14mg/m3;噪声<60dB;工作照度:150～300lx。
1.4 纯净水系统
屏障系统内的用水由一套反渗透纯净水系统供应。自来水经过四级过滤、臭氧和紫外线消毒后送入各个房间。
1.5 消毒灭菌设备
为了保证进入SPF级动物房的物品都经过彻底的消毒,安装了江苏连云港市千樱医疗设备有限公司生产的脉动真空蒸汽灭菌器。
1.6 监控系统
屏障系统内每间室均安装了可作270°旋转的摄像机,工作人员可在监控室进行24h的监控、录像,减少对动物的滋扰。
1.7 通讯系统
屏障系统内安装了多台电话,方便联系工作。
1.8 照明、紫外灯系统
洁净走廊、次洁净走廊、各实验室等均装有采用自动开关控制日光灯和紫外线灯。每天早上7:30开启日光灯,19:30自动关闭日光灯;洁净走廊、次洁净走廊和没有饲养动物的房间在每天12:30和20:00自动开启紫外线灯1h。
1.9 动物饲养笼具
饲养大小鼠的笼具主要采用聚碳酸脂(PC)作为原材料,具有耐高温、高压,耐酸碱,透明度高的特点。
1.10 饲料配制
饲养大小鼠的配合饲料严格按照《实验动物小鼠大鼠配合饲料(GB149241322001)进行配制生产[2],定期(6个月)对饲料的有效营养成分和卫生学指标进行监测,保证配合饲料符合饲养要求。
2 SPF级动物房的运作与管理
2.1 严格科学的管理是保证实验质量的重要环节
在我中心实验动物房开始运作时,我们一直坚持严格控制其环境质量,从动物房的平面、净化设施等的设计到设施建设,全程均在广东省实验动物学会的专家指导下完成。每年坚持在实验动物环境设施合格证到期时,主动申请广东省实验动物监测所的专家进行检测和指导,查明其中的问题与可能存在的隐患。同时,每年对屏障系统的内外环境进行自检,保证设施的正常运行。在加强硬件管理的同时,我们还制定了一系列的管理措施,从各方面保证动物房在符合质量体系要求的状况下有效运行。
2.2 制定SPF级动物房的管理制度和操作的作业指导书
为了保证SPF级动物房的正常运行,我们制定了一整套科学可行的管理制度和相应的作业指导书,以规范日常的每一项工作,从而使SPF级动物房在符合要求的状况下正常运作。制定的规章制度和作业指导书有:《SPF级动物实验室管理操作规程》,《恒温恒湿系统操作规程》,《反渗透纯水系统操作规程》,《闭路监控系统操作规程》,《脉动真空蒸汽灭菌器操作规程》,《物品消毒操作规程》,《待检样品进入SPF级动物实验室操作规程》,《人员进入SPF级动物实验室操作规程》,《动物进入SPF级动物实验室操作规程》,《动物饲养操作规程》,《SPF级动物实验室内外环境消毒操作规程》,《实验动物管理操作规程》。
2.3 加强人员培训,提高职业素质
因工作关系需要进入SPF级动物房的实验人员和工作人员,必须通过广东省实验动物学会举办的“实验动物技术培训班”的学习,在取得《广东省实验动物从业人员资格证书》后才能上岗。在日常的工作中,经常组织职工学习规章制度和业务知识,加强职工思想品德教育,提高对实验动物学科的认识。
2.4 严格执行工作人员体检制度
实验动物工作人员每年体检一次。患有传染性疾病特别是人畜共患病的,患病期间不得继续从事实验动物饲养、研究工作。
215 严格规定人员、物品、动物的流向
严格遵循单向流动的原则。
人员流向:外环境→第一更衣→淋浴→第二更衣→风淋→洁净走廊→实验室→次洁净走廊→缓冲间→外环境
动物流向:购买SPF级动物→检疫/观察室→实验室→次洁净走廊→缓冲间→解剖室
物品流向:洗消间→高压灭菌设备/渡槽/传递窗→消毒物品储存室→实验室→次洁净走廊→缓冲间→外环境
2.6 合理选择消毒方法
根据进入SPF级动物房的各种物品的不同特性,选择不同的消毒方法。饲养笼盒、饮水瓶、垫料、衣服和各种实验用具采用高压蒸汽灭菌器消毒;动物食用饲料采用放射性照射(60Co)的消毒方法;工作人员用的拖鞋等采用渡槽浸泡的方
法(015%灭菌净溶液)消毒;对于不耐热、不耐水、不耐酸碱和不能进行放射性照射的物品采用传递窗紫外线消毒。
2.7 保持设备的正常运行,积极开展各项指标的检测工作
经常对空调通风系统进行保养,每1～2周更换排风口过滤膜,每两个月更换一次初效和中效过滤袋,每年更换一次高效过滤膜;每半年检测一次外购饲料的微生物指标和营养成分,每半年检测一次纯净水的微生物指标;每天对温湿度、压差等进行监测。
2.8 认真做好屏障环境内外的清洁消毒工作
保持屏障环境内的洁净度是SPF级动物房正常运行的关键。每天的实验和饲养工作完成后,对室内环境进行清洁,每周3次用灭菌净消毒水对整个屏障系统的内环境和饲养笼架进行消毒。
2.9 做好日常各项登记工作
设立《人员进出登记本》、《物品进出登记本》、《动物实验登记本》、《实验室环境指标登记本》,认真做好每一天的记录;建立实验动物数据库,对每批购买的动物的来源、品种、数量、体重、合格证号和检疫情况进行详细记录,并可随时在电脑中查阅。
2.10 妥善处理动物尸体
动物实验结束后,将动物处死,暂时存放在-20℃的冰箱内,统一送卫生处理厂作焚烧处理。
3 运行中存在的问题及建议311 环境条件的保持
广东省气候温暖潮湿,采用全新空调通风系统对于温湿度的控制有一定的困难,如在进风口处增加一套预冷除湿设备将有效提高整个系统的性能。
3.2 饲料的营养成分
不论采用放射性照射还是高温高压的方法对动物的饲料进行消毒,都不可避免地会使部分营养成分减少,特别是各种维生素。因此,必须经常在饲料和饮水中补充鸡蛋、瓜子和多种维生素,从而确保实验动物的营养和健康。
3.3 人员与操作的问题
实验人员和其他工作人员进入动物房前,更衣淋浴工作较难进行控制;淋浴间的湿度较大,容易导致细菌的生长繁殖;工作人员是否严格按照规范穿着专用的工作服等等,这些因素都会对环境造成一定的影响。因此,应经常对职工进行职业道德教育,加大管理力度。
3.4 能源节约问题
屏障系统24h全天候运作,过滤器、紫外灯、特制的饲养笼具需经常进行更换,水电费的巨额支出等,使得维护保养的费用很大。如何节约能源,有效降低运行成本是维持SPF级动物房长久运作的一个不可回避的问题。
随着《实验动物许可证管理办法》的实施,动物实验的要求不断提高,实验动物的管理将逐步加强,实验动物屏障设施的使用也越来越广泛,因此,在SPF级动物房的设计与建设时,应组织专家进行论证,尽可能减少现有问题的重复出现,同时应将节约能源的问题摆在重要的位置。
