来自天津科技大学、军需装备研究所的董扬、郝利民、刘宇琪等将灵芝发酵液接种在灵芝孢子粉中进行固体发酵培养,发酵液中的酶系作用于灵芝孢子壁,使孢子壁出现裂隙,随后再进行机械破壁,不仅可以提高破壁率,还可有效保留灵芝孢子粉中的热敏活性成分。旨在以未破壁灵芝孢子(UGS)为对照,探讨机械破壁法、生物与机械复合破壁法对灵芝孢子粗多糖抗氧化活性的影响,为灵芝孢子资源的应用提供技术参考。
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灵芝粗多糖的DPPH自由基清除能力
UGS、MGS、BGS处理所得粗多糖及阳性对照VC对DPPH自由基均具有一定清除能力,在实验质量浓度范围内,粗多糖质量浓度越高,DPPH自由基清除率越强。相同质量浓度时,3 种处理方法所得粗多糖及VC的DPPH自由基的清除率由大到小依次为:VC>BGS>MGS>UGS。复合法破壁的灵芝孢子粗多糖对DPPH自由基具有较强的清除能力。
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灵芝粗多糖的?OH清除能力
UGS、MGS、BGS所得粗多糖及阳性对照VC对?OH均具有一定清除能力,在实验质量浓度范围内,粗多糖质量浓度越高,?OH清除率越强。相同质量浓度时,3 种处理方法中粗多糖的?OH清除率最强的是BGS。粗多糖质量浓度为5.0 mg/mL时,UGS、MGS、BGS对粗多糖的?OH清除率分别为59.8%、55.2%、91.0%。因此,复合法破壁的灵芝孢子粗多糖对?OH具有较强的清除能力。
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灵芝粗多糖的ABTS+?清除能力
UGS、MGS、BGS所得粗多糖及阳性对照VC对ABTS+?均具有一定清除能力,在实验质量浓度范围内,粗多糖质量浓度越高,ABTS+?清除率越强。相同浓度时,3 种处理方法中粗多糖的ABTS+?清除率最强的是BGS,远高于MGS和UGS;MGS对粗多糖的ABTS+?清除率略高于UGS。粗多糖质量浓度为5.0 mg/mL,3 种处理方法对粗多糖的ABTS+?清除率均达99.0%以上;质量浓度大于1.0 mg/L时,BGS所得粗多糖的ABTS+?清除率与VC接近。复合法破壁的灵芝孢子粗多糖对ABTS+?具有较强的清除能力。
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灵芝粗多糖的还原能力
UGS、MGS、BGS所得粗多糖及阳性对照VC均具有一定的还原能力,在实验质量浓度范围内,粗多糖质量浓度越高,还原力越强。相同质量浓度时,3 种处理方法中粗多糖的还原力最强的是BGS,UGS与MGS还原力接近。复合法破壁的灵芝孢子粗多糖具有较强的还原力。
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灵芝粗多糖的紫外损伤酵母细胞保护能力
UGS、MGS、BGS所得粗多糖及阳性对照VC对紫外损伤酵母细胞均具有一定的保护能力,在实验质量浓度范围内,粗多糖质量浓度越高,酵母细胞存活率越高,粗多糖质量浓度为20.0 mg/mL时酵母细胞的存活率最高,酵母细胞存活率最高的是MGS;粗多糖质量浓度为4.0、8.0、12.0、16.0 mg/mL时,酵母细胞存活率最高的是BGS。因此,复合法破壁的灵芝孢子粗多糖对紫外损伤酵母细胞具有较强的保护能力。
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多糖和蛋白质质量分数
UGS、MGS、BGS 3 种粗多糖的主要成分均为多糖。3 种处理方法所得粗多糖的蛋白质量分数均小于10%,UGS和MGS的蛋白质量分数接近;BGS的蛋白质量分数最高。综上所述,复合法破壁灵芝孢子粗多糖的抗氧化活性显着高于未破壁及机械法破壁灵芝孢子粗多糖。
结 论
采用5 种体外抗氧化实验,对UGS、MGS、BGS所得粗多糖的抗氧化活性进行了对比研究,表明BGS粗多糖具有较高的抗氧化活性,该实验结果对灵芝孢子作为抗氧化剂的开发具有参考价值。